[發明專利]一種用于結核病預防的重組卡介苗有效
| 申請號： | 201010140373.0 | 申請日： | 2010-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN101822829A | 公開（公告）日： | 2010-09-08 |
| 發明（設計）人： | 鮑朗;楊曉玲;鄧儀昊 | 申請（專利權）人： | 四川大學 |
| 主分類號： | A61K39/04 | 分類號： | A61K39/04;C12N15/62;C12N15/74;C12N1/21;A61P31/06 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 610041 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 結核病 預防 重組 卡介苗 | ||
【權利要求書】：
1.一種重組卡介苗rBCG：GMCSF-CFP10-ESAT6，其特征在于，將GMCSF-CFP10-ESAT6嵌合 基因重組入卡介苗。
2.如權利要求1所述的重組卡介苗的制備方法，其特征在于，該方法包括以下幾個步驟：
(1)hGM-CSF基因的擴增、結核分枝桿菌CFP10基因和ESAT6基因的擴增；
(2)CFP10-ESAT6融合基因的擴增；
(3)GMCSF-CFP10-ESAT6嵌合基因的擴增；
(4)將GMCSF-CFP10-ESAT6嵌合基因插入至大腸桿菌-結核分枝桿菌穿梭質粒pMV361中，構 建rpMV361GMCSF-CFP10-ESAT6；
(5)將(4)中的重組質粒電轉化入卡介苗；
(6)用卡那霉素進行篩選；
(7)提取基因組，擴增GMCSF-CFP10-ESAT6嵌合基因；
(8)熱誘導后收集細菌蛋白，Western-blot鑒定GMCSF-CFP10-ESAT6嵌合蛋白的表達。
3.一種重組質粒的制備方法，其特征在于，將人粒-巨噬細胞集落刺激因子(hGM-CSF)序列和結 核分枝桿菌CFP10基因和ESAT6基因序列共同插入大腸桿菌-結核分枝桿菌穿梭質粒序列中。
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