[發明專利]一種檢測蛋白的方法

有效

• 申請號: 201010139720.8
• 申請日: 2010-04-01
• 公開（公告）號: CN102213692A
• 公開（公告）日: 2011-10-12
• 發明（設計）人: 歐陽津;那娜;黃常剛;劉璐
• 申請（專利權）人: 北京師范大學
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447;G01N21/64
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種檢測蛋白的方法，包括如下步驟：

1)將待測蛋白進行凝膠電泳，使待測蛋白得到分離，并以條帶形式或點的形式分布在凝膠上，將得到的凝膠記作帶有蛋白條帶或蛋白點的凝膠；

2)將所述帶有蛋白條帶或蛋白點的凝膠置于量子點溶液中，浸泡，所述量子點與所述帶有蛋白條帶或蛋白點的凝膠中的蛋白條帶或蛋白點結合，得到蛋白條帶-量子點結合體或蛋白點-量子點結合體，將得到的凝膠記作帶有蛋白-量子點結合體的凝膠；

3)將所述帶有蛋白-量子點結合體的凝膠進行凝膠成像，得到所述待測蛋白的凝膠電泳圖像，即實現所述待測蛋白的檢測。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述量子點溶液為如下1)、2)或3)所示：

1)所述量子點溶液是按照包括如下步驟的方法配制得到的：將所述量子點溶于水中，再調節pH值至3.6-4.4，具體為3.6、3.7或4.4，得到所述量子點溶液；所述量子點在所述量子點溶液中的濃度為0.1mM-0.3mM，具體為0.1mM、0.2mM或0.3mM；

2)所述量子點溶液由所述量子點、可溶性堿和水組成，所述量子點在所述量子點溶液中的濃度為0.2mM-0.325mM，具體為0.2mM、0.27mM或0.325mM，所述可溶性堿在所述量子點溶液中的濃度為1.8-3.0mol/L，具體為1.8mol/L、2.1mol/L或3.0mol/L；

3)所述量子點溶液由所述量子點、可溶性堿、N，N，N’，N’-四甲基乙二胺和水組成，所述量子點在所述量子點溶液中的濃度為0.2mM-0.325mM，具體為0.2mM、0.27mM或0.325mM，所述可溶性堿在所述量子點溶液中的濃度為1.8-3.0mol/L，具體為1.8mol/L、2.1mol/L或3.0mol/L，所述N，N，N’，N’-四甲基乙二胺在所述量子點溶液中的濃度為9.9mM-26.5mM，具體為9.9mM、17.9mM或26.5mM。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述1)所示的量子點溶液中，是用巰基乙酸或巰基乙酸的水溶液調節pH值的，所述巰基乙酸在所述量子點溶液中的濃度為0.4％-0.6％(體積百分含量)，具體為0.4％、0.5％或0.6％；

所述2)所示的量子點溶液中，所述可溶性堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀；

所述3)所示的量子點溶液中，所述可溶性堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀。

4.根據權利要求1、2或3所述的方法，其特征在于：所述浸泡的時間為1h-4h，具體為1h、2h或4h。

5.根據權利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述方法中，所述量子點溶液為所述1)所示，所述浸泡的時間為2h或4h；

所述量子點溶液為所述2)所示，所述浸泡的時間為1h；

所述量子點溶液為所述3)所示，所述浸泡的時間為1h。

6.根據權利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述量子點的結構如下：所述量子點由核心層和殼層組成，核心層為碲化鎘，殼層為巰基乙酸，殼層通過靜電作用覆蓋于核心層的周圍；靜電作用是指巰基乙酸中帶孤對電子的S與CdTe中帶正電荷的Cd之間形成的靜電作用；和/或，所述量子點的粒徑為3-5nm；和/或，所述量子點的發射波長為520nm；和/或，所述量子點的激發波長為250nm-380nm。

7.根據權利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述量子點是按照包括如下步驟的方法得到的：

1)將0.1276g碲粉溶于10mL水中，磁攪拌，充氮氣15-20min，得到溶液I；

2)向溶液I中加入0.08gNaBH₄，在充氮氣的條件下反應4h，得到溶液II，溶液II分上層清液和下層沉淀；

3)將0.45672gCdCl₂·2.5H₂O和420μL巰基乙酸加入200mL水中，攪拌，用NaOH調節pH值至9.2，在充氮氣的條件下反應30min，得到溶液III；

4)將所述溶液II中上層清液加入所述溶液III中，在充氮氣的條件下反應30min，得到溶液IV；

5)將溶液IV置于80度且密封條件下反應3.5h，得到所述量子點；

所述充氮氣的速度為0.8L/min。