[發明專利]哈巴俄苷在制藥中的應用

有效

• 申請號: 201010136665.7
• 申請日: 2010-03-26
• 公開（公告）號: CN102198143A
• 公開（公告）日: 2011-09-28
• 發明（設計）人: 胡雅兒;夏宗勤;張永芳;熊中奎
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院
• 主分類號: A61K31/7048
• 分類號: A61K31/7048;A61P25/16;A23L1/29
• 代理公司: 上海翼勝專利商標事務所(普通合伙) 31218
• 代理人: 翟羽

【技術領域】

本發明涉及哈巴俄苷(harpagoside)在制藥中的用途。

【背景技術】

中樞神經系統的常見疾病如帕金森病(Parkinson’Disease，PD)越來越受重視。盡管它的原發病因尚未闡明，但隨著研究的不斷深入，屬于神經退行性病變這一點卻越來越明確。帕金森癥主要是和運動系統有關的神經細胞發生退行性病變，這些變化和氧應激引起的黑質中多巴胺神經元變性密切有關。目前對這一疾病臨床上主要還是對癥療法，主要用多巴類藥物，不能改善神經退行性病變的進程，長期使用甚至可能導致病變的加重。

目前國際上正在大力研究能延緩或糾正神經退行性病變的藥物。已有大量研究表明，神經營養因子是有特異活性作用的蛋白質具有明顯的神經保護作用，包括膠質細胞源神經生長因子(glial?cell?line?derived?neurotrophic?factor，GDNF)、腦源性神經生長因子(brain-derived?neurotrophic?factor，BDNF)和保守性多巴胺神經營養因子(conserved?dopamine?neurotrophic?factor，CDNF)。GDNF、BDNF在PD時降低，它們都是多肽，不能直接透過血腦屏障，因此作為藥物應用確有困難。因此，有不少研究試圖以神經營養因子為靶點，尋找能提高腦內這些神經營養因子的藥物，例如，實驗室研究已經發現rasagiline，pramipexole和ropinirole能提高某些培養細胞的GDNF，但是這些化合物本身多為多巴類藥物，實際臨床應用中它們是否確實能通過改善神經退行性病變而排除這些藥物本身固有的缺點，還有待研究。

哈巴俄苷(harpagoside，)是一種環烯醚萜類化合物，分子式為：C24H30011，中藥玄參的主要活性成分之一。

目前用于熱病傷陰，舌絳煩渴，溫毒發斑，津傷便秘，骨蒸勞嗽，目赤，咽痛，瘰疬，白喉，癰腫瘡毒(胡瑛瑛，黃真.玄參的化學成分及藥理作用研究進展.浙江中醫藥大學學報，2008.268-270)；謝麗華等的動物實驗研究表明皮下注射哈巴俄苷能夠增強陰虛小鼠的免疫功能。在歐美等地常用于疼痛和骨關節炎的輔助治療；韓國學者Kim等從北玄參中研究發現哈巴俄苷對谷氨酸誘導的大鼠皮層神經元損傷在0.1～10μM濃度范圍內都有保護作用。另外從北玄參分離的哈巴俄苷改善東莨菪堿損傷的小鼠記憶，并且具有抗氧化的活性。其對PD細胞模型和PD整體動物模型的作用效果尚未有報道。

【發明內容】

本發明的目的在于提供哈巴俄苷在制藥中的新用途。

具體地說，本發明涉及哈巴俄苷在制備治療或預防帕金森氏癥藥物中的應用。

哈巴俄苷在制備治療或預防帕金森氏癥藥物中的應用時，濃度優選為10^-6M-10^-5M數量級。

涉及哈巴俄苷在制備治療或預防帕金森氏癥保健品中的應用。

哈巴俄苷在制備治療或預防帕金森氏癥保健品中的應用時，濃度優選為10^-7M數量級。

哈巴俄苷保護或修復腦多巴胺神經元的作用通過誘導GDNF的表達來實現。

為了更好的理解本發明的實質，下面將用哈巴俄苷的藥理實驗和結果來說明其在制藥領域中的新用途。

(一)哈巴俄苷對PD細胞模型的神經保護作用

一、哈巴俄苷對MPTP⁺誘導PD細胞模型的神經保護作用

實驗方法：

1.中腦多巴胺神經元的培養：將妊娠14～15天的SD大鼠用無水乙醚在密閉空間中麻醉，采用無菌操作方式取出胚胎中腦腹側部分。0.125％胰酶的D-Hanks溶液消化5min，吸棄部分胰酶消化液，再加入DMEM/F12培養基(內含10％胎牛血清、5％馬血清、50U/ml青霉素和50μg/ml鏈霉素)終止反應。輕輕吹打使之成細胞懸液，200目篩過濾。濾液經1000rpm離心5min收集細胞，以含血清DMEM/F12培養基重懸細胞沉淀，按照1×10⁵/cm²的密度接種到預先經多聚賴氨酸包被的BD?FalconTM?96孔細胞培養板中，置于飽和蒸汽二氧化碳培養箱(5％CO₂，37℃)，3天后換成無血清含1％B27DMEM/F12培養基，以后每3～4天換液一次。培養的第7天進行后續實驗。