[發明專利]一種簡便的牙鲆幼魚性別判定方法

無效

• 申請號: 201010136435.0
• 申請日: 2010-03-30
• 公開（公告）號: CN101803578A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發明（設計）人: 孫鵬;彭士明;尹飛;施兆鴻
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院東海水產研究所
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達;謝文凱

技術領域

本發明屬鲆鰈魚類性別的判定領域，特別是涉及于一種簡便的牙鲆幼魚的性別判定方法。

背景技術

性別判定是研究魚類繁殖與發育的基礎，魚類的性腺分為精巢和卵巢，在魚類的繁育中 具有不同的功能。在魚類研究中，包括魚類的繁殖發育、內分泌調節、外界環境及化學物質 等對魚類的繁殖與生理影響等均需要判定其性別。牙鲆等鲆鰈魚類具有雌性個體生長速度大 于雄性個體的特點，為了提高生產效益，單性育種技術如雌核發育、激素誘導雌性化及溫度 性別決定等逐漸發展起來。而在這些研究中均需要大量判定幼魚的性別，進行性別比例計算 以研究人工性別控制的成效。同樣，在對鲆鰈魚類進行內分泌調控研究時，亦需要首先確定 其性別組成。

由于魚類幼魚的性腺還未發育成熟，性腺組織較小，呈細小的現狀，不能用肉眼分辨性 別，通常情況下，性別判定主要依靠組織切片技術進行。但是，組織切片技術操作步驟較多， 如大量判定必定花費較多的人力物力，且其操作過程中的二甲苯等化學物質對操作人員健康 有較大的危害。

發明內容

本發明需要解決的問題是提供了一種簡便的牙鲆幼魚性別判定方法。該發明流程簡單， 易操作，整個過程耗時少，結果穩定可靠，無需特殊或昂貴的儀器，成本少，所需試劑少， 減少操作人員組織切片過程中所接觸的多種有毒化學物質，對操作人員傷害極小。

本發明的一種簡便的牙鲆幼魚性別判定方法，包括：

(1)取新鮮的牙鲆幼魚，稱量后解剖并將含有性腺組織的腹部固定于Davision’s?AFA固定 液中，在固定24h后換用70％乙醇長期保持；

(2)將固定的牙鲆腹部放置在載玻片上，將其置于解剖鏡下，剝去其表皮和肌肉組織，取出 完整的性腺組織；

(3)將性腺靠近腎臟的一端放于解剖鏡視野中央，用解剖針和鑷子輕輕撫平其表皮部分；

(4)觀察近腎臟一端性腺部分表皮內性腺組織的形狀，根據形狀的不同判定其性別。

所述步驟(1)中Davision’s?AFA固定液由無水乙醇、甲醛、冰乙酸按體積比6∶3∶1 的比例配制。

所述步驟(4)中根據形狀的不同判定其性別方法為若性腺較大且呈“心”形則為雌性， 若性腺細長且呈細長的“D”形則為雄性。

本發明根據牙鲆等鲆鰈魚類的性腺組織結構及其形狀的不同，設計出快捷的不經組織切 片技術的性別判定方法，經過反復試驗及組織切片證明，所述方法可以準確地判定性別分化 后全長在6.0cm以上的牙鲆幼魚的性別，本發明可以用于牙鲆等鲆鰈魚類的神經內分泌調控、 單性培育及環境因子性別調控等研究中，具有廣泛的適用性。

有益效果

(1)本發明流程簡單，易操作，整個過程耗時少，結果穩定可靠；

(2)無需特殊或昂貴的儀器，成本少，所需試劑少，減少操作人員組織切片過程中所接觸的 多種有毒化學物質，對操作人員傷害極小。

附圖說明

圖1為解剖鏡下取出的牙鲆性腺組織；

圖2為雌性牙鲆的“心”形性腺；

圖3為雄性牙鲆的“D”形性腺。

具體實施方式

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不 用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可 以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。

實施例1

(1)取新鮮的牙鲆幼魚，稱量(全長6.9cm，2.78g)，解剖并將含有性腺組織的腹部固定 于Davision’s?AFA固定液(無水乙醇、甲醛、冰乙酸按照體積比6∶3∶1配制)中，在固 定24h后換用70％乙醇長期保持；

(2)取固定的牙鲆腹部放置在載玻片上，將其置于解剖鏡下，剝去其表皮和肌肉組織，取出 完整的性腺組織；

(3)將性腺靠近腎臟的一端放于解剖鏡視野中央，用解剖針和鑷子輕輕撫平其表皮部分；

(4)觀察近腎臟一端性腺部分表皮內性腺組織的形狀，根據形狀的不同判定其性別；性 腺細長且呈細長的“D”形，判定其性別為雄性。將該性腺組織做常規石蠟切片，染色后觀察， 經驗證其性腺為雄性，精巢呈細長的棒狀，與解剖鏡鏡檢結果一致。

實施例2