[發明專利]水產養殖用的殼聚糖硫酸酯免疫增強劑

無效

• 申請號: 201010134762.2
• 申請日: 2010-03-29
• 公開（公告）號: CN102204925A
• 公開（公告）日: 2011-10-05
• 發明（設計）人: 房文紅;周帥;胡琳琳;周常
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院東海水產研究所
• 主分類號: A61K31/722
• 分類號: A61K31/722;A61P31/04;A61P37/04;A23K1/17;A23K1/18
• 代理公司: 上海東方易知識產權事務所 31121
• 代理人: 歐陽俊立

技術領域

本發明涉及一種水產養殖用的免疫增強劑。

背景技術

水產養殖業迅速崛起，現已成為我國農業發展的重要組成部分。但隨著養殖面積的擴增，養殖密度的升高，以及養殖技術水平的相對滯后，導致目前養殖生態遭到了嚴重的破壞，水產病害頻頻發生，給我國水產養殖業造成了巨大的經濟損失。細菌性敗血病是我國淡水養殖區域普遍流行的傳染性疾病，該病的感染譜廣，死亡率高，幾乎可以感染所有的養殖魚類，其中主要對鯽、鳊、鰱、鳙、鯉、草魚、鯪和鱖等2齡魚危害較大。細菌性敗血病適宜發病的水溫為20～37℃，以25～30℃發病率最高，因此它流行季節較長，從4至11月均有發生，6～9月為發病高峰期。患此病的魚從發現到死亡僅3～5d，死亡率一般在50％以上，嚴重時可達到100％。根據現有的文獻，該病是由嗜水氣單胞菌(Aeromonas?hydrophila)、溫和氣單胞菌(A.sobria)和魯克氏耶爾森明菌(Yersinia?ruckeri)等細菌感染引起的多種淡水養殖魚類敗血病，其中以嗜水氣單胞菌最為常見。嗜水氣單胞菌對水產動物、畜禽和人類均有致病性，是一種典型人—獸—魚共患病病原，可引起多種水產動物的敗血癥和人類腹瀉，為此已引起國內外水產界、獸醫學界和醫學界學者的高度重視。

目前用于水產養殖業防治細菌性敗血病的有抗生素、滅活疫苗、亞單位疫苗、基因工程疫苗和微生態制劑等。但是由于化學藥物的應用不當產生的細菌耐藥性、藥物殘留以及對水環境的污染問題日益顯著，口服滅活疫苗的防治效果欠佳，基因工程疫苗的制備工藝復雜、成本高等，故尋找安全、有效、環保的新型藥物成為防治細菌性敗血病亟待解決的問題。

殼聚糖(chitosan，CS)是甲殼素脫酰基的產物，是天然多糖中唯一大量存在的堿性氨基多糖，廣泛存在于蝦、蟹和藻類、真菌的細胞壁中。它具有提高水產動物生長性能，增強水產動物免疫力和凈化水質等諸多優點，但它不能溶于水，且易受潮、遇水易分解的性質在一定程度上限制了它在水產養殖領域的推廣。不過殼聚糖還可以通過硫酸酯化、酰化、接枝交聯、羥乙基化和氰乙基化等功能，賦予其不同的特殊性質，從而擴大了它的應用領域。

多糖硫酸酯是多糖上羥基被硫酸基團取代的衍生物，由于所帶硫酸基團的空間位阻和靜電排斥效應改變了多糖原來的空間結構，增加了糖鏈的屈伸度，提高了水溶性，從而引起多糖生物活性的改變。多糖硫酸酯藥物作為一種新型藥物具有很多優勢，如具有良好的抗病毒、抗腫瘤、抗凝血和增強免疫等生物學活性。如香菇多糖、地衣多糖、木聚糖、牛膝多糖等原來不具有抗病毒活性的多糖，經硫酸酯化修飾后都顯示出抗病毒活性。金頂側耳多糖、箬葉多糖等本身具有抗病毒活性的多糖，經硫酸酯化修飾后，其抗病毒活性顯著提高。所以現階段為了提高多糖的生物活性，常通過硫酸化修飾等方法對其進行結構改造，以獲取更多的多糖硫酸酯。

發明內容

本發明的目的在于提供一種水產養殖用的免疫增強劑。

本發明采用分子量為10000～30000殼聚糖硫酸酯，其特征是將該殼聚糖硫酸酯粉末溶于無菌生理鹽水中，配制成濃度為2.5～20mg/mL的殼聚糖硫酸酯水溶液，或將該殼聚糖硫酸酯添加到水產養殖用的飼料中；該水產養殖用的飼料含量中含有殼聚糖硫酸酯0.1～0.4％，魚粉40％、豆粉23％、麥麩7.1～7.4％、魚油24％、水產品復合維生素3％、礦物質1％、卵磷脂1％和膽固醇0.5％；飼料投喂時殼聚糖硫酸酯的劑量為20～40mg/kg魚體重。

本發明殼聚糖硫酸酯免疫增強劑的優點在于簡單易行、成本低且易獲得，克服了現有原料和方法的不足，在水產養殖中使用可凈化水質，尤其是該免疫增強劑安全、環保，不會引發藥物殘留或對養殖水環境造成污染，效果顯著。

具體實施方式

實施例1：

將殼聚糖硫酸酯粉末溶于無菌生理鹽水中，配制成濃度為2.5、5、10和20mg/mL的殼聚糖硫酸酯水溶液。本實施例通過下述試驗證明殼聚糖硫酸酯水劑可增強水產動物的抗病能力，提高存活率。

(1)試驗菌株

嗜水氣單胞菌，是從發病異育銀鯽腹水中分離、純化后，經細菌生理生化指標和16s?rDNA檢測、鑒定而得到的，其LC₅₀為8.55×10⁴cfu/g。對該菌株復壯培養24h的細菌懸液計數，并稀釋其濃度至1×10⁹cfu/mL備用于攻毒實驗。

(2)試驗動物

異育銀鯽(Carassius?auratus)，體表無損傷、健康，體重50g左右。

(3)試驗設計