[發明專利]一種廣泛耐藥摩氏摩根菌及其在新型抗菌藥物篩選中的應用

有效

• 申請號: 201010134384.8
• 申請日: 2010-03-29
• 公開（公告）號: CN102206589A
• 公開（公告）日: 2011-10-05
• 發明（設計）人: 肖春玲;鄭旭東;慕福琴;關艷;甘茂羅;郝雪秦;劉憶霜
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院醫藥生物技術研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/18;C12R1/01
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 程泳

技術領域

本發明涉及微生物領域，尤其是涉及一種廣泛耐藥(extensivedrug?resistant，EDR)摩氏摩根菌，以及該摩氏摩根菌在新型抗菌藥物篩選中的應用。

背景技術

目前，由于抗菌藥物的廣泛使用，細菌對抗菌藥物的耐藥性日益嚴重，因此，迫切需要發現具有新結構和新作用機制的抗細菌化合物，以有效地治療耐藥菌引起的一系列疾病(Coates?AR，Hu?Y.Novelapproaches?to?developing?new?antibiotics?for?bacterialinfections.Br?J?Pharmacol，2007，152：1147-1154.；Davies?J.Where?have?all?the?antibiotics?gone？CanJ?Infect?Dis?MedMicrobiol，2006，17：287-290.)。

通過以廣泛耐藥菌(對多種抗菌藥物耐藥的細菌)為模式生物構建細胞水平的藥物篩選模型進行新藥的篩選，既可以排除已知作用機制的化合物干擾，提高新藥發現的效率，又可以避免單靶點的分子模型帶來的漏篩，有可能由此發現尚未發現的全新靶點的抗菌藥物。但是目前還沒有合適的廣泛耐藥菌株可以用于藥物篩選，因此，尋找廣泛耐藥的新型耐藥菌株是新藥篩選領域亟需解決的技術問題。

摩氏摩根菌屬于革蘭氏陰性桿菌，廣泛分布于多種自然環境以及人和動物的腸道內。臨床分離的摩氏摩根菌常具有對β-內酰胺類抗菌藥物的天然的耐藥性，例如對青霉素、氨芐西林、氨芐西林和蘇巴坦組合劑、苯唑西林、第一和第二代頭孢霉素、紅霉素、多黏菌素E、多黏菌素B等常見抗菌藥物天然耐藥。而對哌拉西林、替卡西林、美洛西林、第三和第四代頭孢霉素、碳青霉烯類、氨曲南、氟喹諾酮類、氨基糖苷類、氯霉素類抗菌藥物敏感(James?R?Miller：MorganellaInfections?[Online].Retrieved?from?http://emedicine.medscape.com/article/222443-treatment)。

本發明人進行了深入的研究，分別在培養基中加入青霉素、頭孢吡肟、鏈霉素、環丙沙星、左氧氟沙星、交沙霉素、桿菌肽、粘菌素、利福平、磺胺甲惡唑等，以此作為耐藥菌的耐藥篩選指標，終于從養殖池塘水體和病死的鮑魚體內菌群中篩選出了能夠耐受上述藥物的新型摩氏摩根菌。獲得的廣泛耐藥摩氏摩根菌除具有上述的天然耐藥性之外，對野生型應該敏感的氨基糖苷類、喹諾酮類和氯霉素類等抗菌藥物耐藥性也明顯提高。從而為構建細胞水平的新型抗菌藥物篩選模型提供了一個理想的廣泛耐藥菌，進而提供了新型的抗菌藥物篩選模型。

發明內容

本發明的一個方面涉及一種摩氏摩根菌，其保藏編號為CGMCCNo.3655，保藏日期2010年3月10日，保藏單位是中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)。

本發明的另一方面涉及所述的摩氏摩根菌在新型抗菌藥物篩選中的應用。

本發明的又一方面涉及一種篩選新型抗菌藥物的方法，其特征在于，所述方法使用本發明的摩氏摩根菌。利用上述廣泛耐藥菌的摩式摩根菌作為模式生物，聯合使用敏感型的摩式摩根菌，通過比較不同樣品對二者抑菌活性的差異，發現具有新結構和新作用機制的抗廣泛耐藥菌的藥物。

在本發明的一個實施方案中，所述方法包括初篩步驟和復篩步驟。

在本發明的一個實施方案中，所述初篩步驟為紙片法或96孔板法。

在本發明的一個實施方案中，所述新型抗菌藥物來自微生物發酵液、植物提取液、或化合物。

本發明人以本發明的摩氏摩根菌作為篩選模型，對已知結構和作用機制的化合物進行篩選，評價模型對傳統作用機制抗菌藥物的抗干擾能力。同時利用耐藥菌篩選化合物庫，計算初篩模型的陽性率并與模型評價標準進行比較判斷模型選擇性及可靠性。其中，所述模型評價標準如下：

初篩標準：

1)多數與表1中MIC_R＞100μg/ml抗菌藥物為同類的樣品不能被篩選到；

2)與表1中MIC_R＜100μg/ml抗菌藥物為同類的樣品可以被篩選到；

3)作用機制不同于表1中列舉抗菌藥物的樣品可以被篩選到。

復篩標準：

分別測定初篩陽性樣品對耐藥菌和敏感菌抑菌圈大小和MIC值。