[發明專利]基于蛋白質三聚化模序的高分泌性三聚體蛋白的表達方法有效
| 申請號: | 201010133096.0 | 申請日: | 2010-03-12 |
| 公開(公告)號: | CN101948864A | 公開(公告)日: | 2011-01-19 |
| 發明(設計)人: | 凌虹;王甲業;李妍;陳文江;楊丹;程德春 | 申請(專利權)人: | 哈爾濱醫科大學 |
| 主分類號: | C12N15/74 | 分類號: | C12N15/74;C12N15/79 |
| 代理公司: | 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139 | 代理人: | 孫皓晨;費碧華 |
| 地址: | 150081 黑*** | 國省代碼: | 黑龍江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 基于 蛋白質 三聚 化模序 分泌 三聚體 蛋白 表達 方法 | ||
1.一種高分泌性三聚體蛋白的表達方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)將tPA信號肽基因序列、目的蛋白基因序列和蛋白質三聚化模序基因序列連接在一起,得到融合基因;其中,目的蛋白的N末端與tPA信號肽相連,目的蛋白的C末端與蛋白質三聚化模序蛋白N末端相連;
(2)將步驟(1)所得到的融合基因克隆至原核或真核表達載體,構建得到融合蛋白原核或真核表達載體;
(3)利用原核或真核表達系統,體內或體外表達融合蛋白,即得。
2.按照權利要求1所述的表達方法,其特征在于,所述的蛋白質三聚化模序的氨基酸序列為SEQ?ID?NO:2所示。
3.按照權利要求2所述的表達方法,其特征在于,編碼蛋白質三聚化模序的基因序列為SEQ?ID?NO:1所示。
4.按照權利要求1所述的表達方法,其特征在于,所述的tPA信號肽的氨基酸序列為SEQ?ID?NO:4所示。
5.按照權利要求4所述的表達方法,其特征在于,編碼所述tPA信號肽的基因序列為SEQ?ID?NO:3所示。
6.一種重組原核或真核表達載體,其特征在于,包括:tPA信號肽基因序列和蛋白質三聚化模序基因序列。
7.按照權利要求6所述的原核或真核重組表達載體,其特征在于,所述的蛋白質三聚化模序的基因序列為SEQ?ID?NO:1所示。
8.按照權利要求6所述的原核或真核重組表達載體,其特征在于,所述的tPA信號肽的基因序列為SEQ?ID?NO:3所示。
9.權利要求6-8任何一項所述的重組原核或真核表達載體在表達三聚體蛋白中的應用。
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