[發明專利]枯草芽孢桿菌ANSB060的應用

有效

• 申請號: 201010129783.5
• 申請日: 2010-03-19
• 公開（公告）號: CN101822321A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發明（設計）人: 計成;馬秋剛;高欣;董軍;王強;張艷;黎敏
• 申請（專利權）人: 計成;馬秋剛;高欣;董軍;王強;張艷;黎敏
• 主分類號: A23K1/17
• 分類號: A23K1/17
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

技術領域

本發明涉及枯草芽孢桿菌ANSB060的應用，尤其涉及該菌株作為養 殖動物飼料添加劑的應用。

背景技術

現代集約化畜牧生產限制了動物接觸土壤以及其周圍的自然環境， 這種飼養條件下不利于動物建立胃腸道的正常菌群。當外界環境條件發 生變化時，容易導致動物胃腸道微生態菌群失調，從而降低對病原菌的 抵抗力。目前主要是通過改善飼養管理和在日糧中添加抗生素的方法來 降低這種損失，但是隨著抗生素的廣泛使用，其導致的耐藥性和殘留問 題日益凸現出來，引起了從科學工作者到普通消費者的高度關注。益生 素因其安全性、無殘留、有利于生態環境的可持續性發展等優點成為抗 生素替代品的首選，而芽孢桿菌更是益生素中使用最為廣泛的一種微生 態制劑。

前人的研究證實芽孢桿菌具有較好的抗逆性，此類細菌對干燥、高 溫、高壓、氧化等不良的環境抵抗力很強，這種穩定性增加了它作為益 生菌的應用潛力。但是不同的芽孢桿菌的抗逆性不同，篩選出一株高抗 逆性的芽孢桿菌是一種微生態制劑是否發揮作用的重要前提。

與此同時，沙門氏菌、大腸桿菌以及葡萄球菌是畜牧生產中最為常 見的有害菌，對動物的生產性能以及經濟效益的影響十分顯著。芽孢桿 菌對上述菌的生長抑制作用也是衡量其益生效果的重要參數。

只有抗逆性與益生性均較強的芽孢桿菌才能在動物腸道中發揮作 用，平衡微生態區系，產生多種酶類、蛋白以及維生素等，提高動物的 生產性能，維護動物機體的健康。

目前，關于枯草芽孢桿菌ANSB060的益生性和抗逆性，以及在養殖 動物的飲水和飼料中的應用尚未見報道。

發明內容

本發明的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)ANSB060于2009年11 月12日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC No.3440。

本發明涉及枯草芽孢桿菌ANSB060在抑制雞白痢沙門氏菌、大腸桿 菌和/或金黃色葡萄球菌中的應用。所述菌株具有顯著的益生性，可顯著 抑制雞白痢沙門氏菌、大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌等致病菌的生長繁 殖。

優選地，本發明還涉及枯草芽孢桿菌ANSB060在模擬胃液和/或模 擬膽鹽和/或高溫環境中的應用。所述菌株具有較強的抗逆性，可以耐受 模擬胃酸、模擬膽鹽以及高溫環境，并且能保持較高的芽孢存活率。其 中，所述高溫是指75-90℃的溫度范圍；所述芽孢存活率為90％以上。

本發明還涉及枯草芽孢桿菌ANSB060作為養殖動物飼料添加劑的 應用。所述應用是將所述菌株的發酵液添加到養殖動物的飲水和/或飼料 中。

所述枯草芽孢桿菌ANSB060的發酵液在養殖動物飲水中的添加量 為10⁸-10¹⁰CFU/L飲水，優選10¹⁰CFU/L飲水；

所述枯草芽孢桿菌ANSB060的發酵液在養殖動物飼料中的添加量 為10⁸-10¹⁰CFU/Kg飼料，優選10⁹CFU/Kg飼料。

其中，優選地，所述養殖動物為反芻動物，諸如牛、羊；

優選地，所述養殖動物為還包括魚、鴨或鵝；

更優選地，所述養殖動物為肉雞；

更優選地，所述養殖動物為蛋雞；

更優選地，所述養殖動物為豬。

本發明枯草芽孢桿菌ANSB060發酵液的制備方法如下：

取所述枯草芽孢桿菌ANSB060種子液1-5ml，接種到50-100ml培養 基中進行搖瓶發酵培養。

其中，所述枯草芽孢桿菌種子液的培養基和培養條件與發酵的培養 基和培養條件相同，種子液的活菌濃度以10⁹CFU/ml計；

所述搖瓶發酵培養基由如下組分組成：蛋白胨5-10g、葡萄糖5-8g、 磷酸氫二鉀0.1-0.2g、磷酸二氫鉀1.0-2.0g、一水硫酸錳0.5-2.0g、七水硫 酸鎂0.5-2.0g、蒸餾水800-1200mL，pH值為6.5-7.5；

優選地，所述搖瓶發酵培養基由如下組分組成：蛋白胨10g、葡萄糖 5g、磷酸氫二鉀0.15g、磷酸二氫鉀1.5g、一水硫酸錳1.0g、七水硫酸鎂 1.5g、蒸餾水1000mL，pH值為7.0；