[發明專利]一種具有增強免疫作用的樺褐孔菌胞內外混合粗多糖有效
| 申請號: | 201010129604.8 | 申請日: | 2010-03-23 |
| 公開(公告)號: | CN101805763A | 公開(公告)日: | 2010-08-18 |
| 發明(設計)人: | 王琦;王金玲;潘景芝;李玉 | 申請(專利權)人: | 王琦 |
| 主分類號: | C12P19/04 | 分類號: | C12P19/04;C08B37/00;A61K31/715;A61P37/04;C12R1/645 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 130118 吉林*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 具有 增強 免疫 作用 樺褐孔菌胞 內外 混合 多糖 | ||
1.一種樺褐孔菌胞內外混合粗多糖在制備降低肝癌H22小鼠血清中IL-18含量的藥物中的應用,其中樺褐孔 菌胞內外混合粗多糖的制備方法如下:
1.1、無菌條件下取斜面菌種接入新鮮的綜合固體培養基的平皿內,培養溫度26-29℃,培養240-360小時; 該綜合固體培養基配方(g/100ml):馬鈴薯16-26,葡萄糖1.2-3.2,瓊脂1.5-2.5,MgSO40.12-0.2, KH2PO40.28-0.35,VB10.8-1.2mg加水定溶至所需體積,pH值自然;
1.2、一級發酵:在無菌條件下,用6mm的打孔器菌落邊緣處打孔,用接種鏟取6-10塊的菌餅接入含有 100-150ml液體培養基的250ml搖瓶中,置于26-29℃,轉速為120-185rpm/min的搖床中,恒溫培養210-300 小時后進行二級發酵培養;該液體培養基配方(g/100ml):馬鈴薯16-26,葡萄糖1.2-3.2,MgSO40.12-0.2, KH2PO40.28-0.35,VB10.8-1.2mg加水定溶至所需體積,PH值自然;
1.3、二級發酵:取一級發酵液接種于含有250-350ml該液體培養基的1000ml二級搖瓶中,接種量為 10%-13%,置于26-29℃,轉速為120-170rpm/min的搖床中,恒溫培養160-240小時;
1.4、將二級發酵產物進行抽濾,得到樺褐孔菌的菌絲體和發酵液;將菌絲體用蒸餾水沖洗三次,置55-60℃ 鼓風干燥箱中烘干,稱重,60目粉碎,按蒸餾水與菌絲體粉末比45-50∶1置于超聲儀內,48-52℃,65-75Hz 超聲提取40min,重復提取2-3次,合并提取液,45-55℃減壓濃縮至原體積的1/5-1/10,得胞內多糖濃縮 液;將發酵液于45-55℃減壓濃縮至原體積的1/5-1/10,并與胞內多糖濃縮液合并,加入95%乙醇,攪拌, 使乙醇終濃度達到75%-80%,4℃沉淀8-12小時,收集沉淀,用無水乙醇洗滌3次,55-60℃恒溫干燥, 重復2~3次,得樺褐孔菌胞內外混合粗多糖,硫酸-苯酚法測得多糖含量為45%-75%。
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