[發明專利]一種高密度固定生物功能分子的材料的制備方法

無效

• 申請號: 201010126907.4
• 申請日: 2010-03-16
• 公開（公告）號: CN101810888A
• 公開（公告）日: 2010-08-25
• 發明（設計）人: 陳紅;張燕霞;于謙
• 申請（專利權）人: 武漢理工大學
• 主分類號: A61L31/04
• 分類號: A61L31/04;A61L31/14;A61L27/54;A61L27/16;A61L33/06;G01N1/28;G01N33/545;C08F293/00;C03C17/28;C04B41/48;C07K1/14;C07K17/08
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 王守仁

1.一種高密度固定生物功能分子的材料的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)POEGMA改性表面的制備：

將固定有引發劑的材料表面，在氮氣保護下置于含有催化劑/配體體系和OEGMA單體的 溶液中進行ATRP反應，反應溫度為0～45℃，反應時間為0.5～6小時，得到POEGMA改性表面； 所述固定有引發劑的材料為單晶硅或玻璃；該引發劑為α-溴丁酰溴、α-溴代異丁酰溴或α-溴代 丙酰溴；所述的催化劑/配體體系為溴化亞銅/五甲基二亞乙基三胺或溴化銅/抗壞血酸； POEGMA為聚甲基丙烯酸寡聚乙二醇酯的英文縮寫，OEGMA為甲基丙烯酸寡聚乙二醇酯的 英文縮寫，ATRP為原子轉移自由基聚合的英文縮寫；

(2)NHSMA的制備：

在反應裝置中，先按1∶1～1.2∶1的摩爾比將甲基丙烯酰氯緩慢滴入到NHS的溶液中，在三 乙胺存在的條件下攪拌反應，反應溫度為0～35℃，反應時間為1～12小時，得到NHSMA的單 體溶液；再將該單體溶液經過重結晶得到白色晶體NHSMA；所述NHSMA為甲基丙烯酰氧基琥 珀酰亞胺的英文縮寫，所述NHS為N-羥基琥珀酰亞胺的英文縮寫；

(3)POEGMA-PNHSMA改性表面的制備：

將所得的POEGMA改性表面置于含有催化劑/配體體系和所得的NHSMA的單體溶液中 進行二次ATRP反應，反應溫度為70～100℃，反應時間為2～6小時，得到POEGMA-PNHSMA 改性表面；所述的催化劑/配體體系為溴化銅/五甲基二亞乙基三胺，或溴化亞銅/五甲基二亞 乙基三胺；

(4)POEGMA-PNHSMA改性表面固定生物活性分子：

將所得的POEGMA-PNHSMA改性表面置于含有生物活性分子的溶液中進行反應，溫度 控制在0～40℃，反應時間為2～24小時，反應結束后，將所述表面置于鈍化劑(EG)₂NH₂的乙 醇的溶液中對未反應的NHS基團進行鈍化，鈍化溫度為室溫，反應時間為2～12小時；所述的 生物活性分子為生物素酰肼、賴氨酸或其他含有氨基的生物活性分子；

經過上述步驟，最終得到高密度固定生物功能分子材料，該材料表面具有不吸附非特異 蛋白的功能。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的OEGMA單體溶液為水溶液，甲醇溶 液，或水和甲醇的混合溶液。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的NHS溶液為N-羥基琥珀酰亞胺的三 氯甲烷溶液，按W/V計，三乙胺用量為所述溶液的10～25％。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(3)所述的NHSMA單體溶液為苯甲 醚溶液或二甲基亞砜溶液。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的生物活性分子的溶液為乙醇溶液、 乙酸溶液、磷酸鹽緩沖溶液或其他可以溶解相應生物活性分子的溶液。