[發明專利]一種納米二氧化硅包裹蛋白質的方法

無效

• 申請號: 201010126623.5
• 申請日: 2010-03-17
• 公開（公告）號: CN101805407A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發明（設計）人: 曹傲能;葉張梅;蔡正偉;劉振;楊小偉;王海芳
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: C07K17/14
• 分類號: C07K17/14
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 顧勇華

1.一種納米二氧化硅包裹蛋白質的方法，其特征在于具有以下的過程與步驟：

a.3-氨丙基三乙氧基硅烷與蛋白質的共價連接：取1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽 酸鹽、N-羥基丁二酰亞胺、3-氨丙基三乙氧基硅烷三者按摩爾比1∶2∶1.3混合在pH為7.5 的磷酸鹽緩沖液中；并使1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的濃度為0.26摩爾/升， 然后加入一定量的蛋白質，控制蛋白質與3-氨丙基三乙氧基硅烷的質量比為0.9～1.0；磁力 攪拌24小時，然后經脫鹽和超濾，即得3-氨丙基三乙氧基硅烷與蛋白質共價連接的產物；

b.包裹蛋白質的納米二氧化硅的制備：將環己烷、聚乙二醇辛基苯基醚、正己醇三者按 體積比4∶1∶1的比例混合，將100微升超純水和7.2毫升環己烷、1.8毫升聚乙二醇辛基 苯基醚、1.8毫升正辛醇的混合液混合，攪拌均勻，使呈微乳液混合液體系；然后加入上述 混合液總體積的2.7～2.8％的前述預先制備好的3-氨丙基三乙氧基硅烷與蛋白質的共價連接 產物；劇烈攪拌均勻后，再加入一定量的四乙氧基硅烷；四乙氧基硅烷的加入量以上述微乳 液混合液的總體積為計量基準，為微乳液混合液總體積的0.9～1.0％(體積％)；然后磁力攪 拌均勻后加入用60微升氨水引發聚合，在室溫下攪拌反應24小時；接著再加入一定量的丙 酮使納米球沉淀出來；丙酮的加入量為上述總反應物體積的2倍；經洗滌數次以除去表面活 性劑等雜質，最終得到包含有蛋白質的納米二氧化硅顆粒。