[發明專利]一種近紅外光譜測定丹參提取液中鞣質含量的方法

無效

• 申請號: 201010125515.6
• 申請日: 2010-03-16
• 公開（公告）號: CN101780141A
• 公開（公告）日: 2010-07-21
• 發明（設計）人: 瞿海斌;程翼宇;黃紅霞
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K36/537
• 分類號: A61K36/537;A61P9/10;G01N21/25;A61K125/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高

技術領域

本發明屬中藥生產質量監測方法，更具體地說涉及一種近紅外光譜快速測定丹參提取液中鞣質含量的檢測方法。

背景技術

鞣質是中藥材中廣泛存在的一類水溶性多元酚類化合物，具有沉淀蛋白的作用。鞣質在中藥制劑中不僅會影響制劑的穩定性和澄明度，還可能會引起一系列嚴重的生理反應，例如，某些鞣質注入體內會引起黃疸和肝壞死等一系列臨床癥狀。因此，鞣質在中藥制劑過程中常作為雜質除去。近年來中藥注射劑的安全性問題已引起人們的廣泛關注，中藥注射劑中鞣質能與血紅蛋白形成藥物性沉淀；局部組織多次注射可能導致組織壞死，造成無菌炎癥。鞣質檢查是中藥注射劑的特殊檢查項目之一。

丹參為唇形科鼠尾草屬植物丹參(Salvia?miltiorrhiza?Bunge)的干燥根及根莖，是我國傳統醫藥學中應用最早且最廣泛的藥物之一，丹參注射液是國家基本醫療保險藥品乙類品種，對治療冠心病等心血管疾病具有較好的療效。丹參注射液的生產流程包括提取、濃縮、醇沉等精制工序，各工序中的鞣質監測是丹參注射液生產質量控制的重要手段。

中國藥典2005年版一部附錄XB制定了以磷鉬鎢酸為顯色劑，以沒食子酸為對照品，以干酪素為吸附劑的鞣質含量測定法。該分析法操作繁瑣、耗時。遠不能滿足對丹參注射液生產過程進行鞣質含量分析與監控的要求。因此，迫切需要建立簡便、快速的丹參提取液鞣質含量檢測方法，以滿足生產企業對生產過程鞣質含量進行快速監測、優化控制的需求，從而保證最終產品質量。

近紅外光譜(Near-Infrared?Spectroscopy，NIRS)是可見光與中紅外光譜之間波長范圍為780nm～2526nm(12820cm^-1～3958cm^-1波數)的光譜區。該光譜區主要是含氫基團(C-H、N-H、O-H)的倍頻與合頻吸收。與其他光譜技術相比，近紅外光譜具有吸收弱的特點，因此，使得樣品不需要稀釋等預處理，就可直接進行分析。該技術需要與化學計量學結合，其中，常用的化學計量學技術主要有主成分回歸(PCR)和偏最小二乘回歸(PLS)等。近紅外光譜測量方法是一種較好的快速檢測方法，可發展成為一種中藥制劑生產過程在線檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種近紅外光譜測定丹參提取液中鞣質含量的方法，可有效地解決丹參注射液生產過程中提取液鞣質含量快速測定的難點，以提高過程單元的精確控制，從而保證最終產品質量。

本發明的目的是通過如下技術方案實現：

1.校正集樣本的收集：

收集不同批次丹參第1～3次提取過程中獲取的丹參提取液樣本；

2.校正集樣本鞣質含量參照值的測定：

采用2005版中國藥典附錄XB中磷鉬鎢酸/干酪素法測定校正集樣本鞣質含量，

(1)試劑、溶液配置：

磷鉬鎢酸試劑的配制?取Na₂WO₄?100g，Na₂MoO₄?25g，加水700ml使其溶解，加100ml?HCl，50ml?H₃PO₄，加熱回流10h，放冷，再加150g?Li₂SO4，50ml水和0.2ml溴水，煮沸約15min除去殘留的Br，冷卻，加水稀釋至1000ml，過濾，即得，

對照品溶液的配制?精密稱取沒食子酸50mg，置100ml棕色量瓶中，加水溶解，定容，混勻后，精密吸取5.0ml置于50ml棕色量瓶中，加水定容，備用(每ml含沒食子酸0.05mg)，

供試品溶液的配制?精密量取丹參提取液適量于棕色量瓶中，加水稀釋15～35倍，搖勻，濾過，棄去初濾液，備用；

(2)標準曲線測定?分別精密量取對照品溶液0.5ml，1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml置于25ml棕色量瓶中，各加入磷鉬鎢酸試液1ml，再分別精密量取蒸餾水適量，補足體積至13ml，加29％碳酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，放置30min，以相應試劑為空白，照中國藥典2005年版一部附錄VA紫外一可見分光光度法，在760nm波長處測定吸光度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；

(3)總酚含量測定?精密量取供試品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，加入磷鉬鎢酸試液1ml，加水10ml，用29％碳酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，放置30min，以相應試劑為空白，在760nm波長處測定吸光度A，按標準曲線法計算總酚含量。