[發明專利]一種純化重組人血白蛋白的方法有效
| 申請號: | 201010124935.2 | 申請日: | 2010-03-16 |
| 公開(公告)號: | CN102190722A | 公開(公告)日: | 2011-09-21 |
| 發明(設計)人: | 項煒;朱威;陳忠 | 申請(專利權)人: | 上海安睿特生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/765 | 分類號: | C07K14/765;C07K1/22;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16 |
| 代理公司: | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人: | 陳靜 |
| 地址: | 201203 上海市張江高科*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 純化 重組 人血白蛋白 方法 | ||
1.一種純化重組人血清白蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括:
(a)將含有重組人血清白蛋白的發酵液上樣到含有吸附劑的流化床,使得吸附劑選擇性吸附所述重組人血清白蛋白;其中,所述的吸附劑是陰離子交換樹脂;以及
(b)回收被吸附的重組人血清白蛋白。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,上樣前,將所述的含有吸附劑的流化床調節pH7.0-8.0;或
上樣后,將吸附了所述重組人血清白蛋白的含有吸附劑的流化床調節pH7.0-8.0。
3.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述的陰離子交換樹脂是Streamline陰離子交換樹脂。
4.如權利要求3所述的方法,其特征在于,所述的Streamline陰離子交換樹脂選自:Streamline?Q,Streamline?Q?XL,或Streamline?DEAE。
5.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(b)中,還包括:依次采用以下方法進一步純化:(1)疏水層析;(2)脫色;(3)葡聚糖凝膠過濾;(4)陰離子交換樹脂層析。
6.如權利要求5所述的方法,其特征在于,步驟(2)中包括:
(i)采用硼酸或硼酸鹽和二價金屬離子處理經疏水層析的樣液,然后加熱至60±20℃,過濾收獲濾過液;和
(ii)將濾過液進行大孔樹脂脫色,得到經脫色的樣液。
7.如權利要求6所述的方法,其特征在于,在(i)和(ii)之間,還包括步驟:對濾過液進行超濾。
8.如權利要求6所述的方法,其特征在于,二價金屬離子選自:Ca2+或Mg2+;或
硼酸或硼酸鹽的濃度為1~500mM;或
二價金屬離子的濃度在1~500mM之間。
9.如權利要求5所述的方法,其特征在于,所述的大孔樹脂是含有氨基和羥基的共聚高分子多孔樹脂。
10.如權利要求5所述的方法,其特征在于,疏水層析的配基選自:苯基,脂肪族或雜環。
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