[發明專利]一種用于篩選小麥抗葉銹病基因的引物序列及其應用

無效

• 申請號: 201010124621.2
• 申請日: 2010-03-16
• 公開（公告）號: CN101838694A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發明（設計）人: 劉大群;李在峰;張海;李星;王海燕;張汀
• 申請（專利權）人: 河北農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 米文智

技術領域

本發明涉及一種用于篩選小麥抗葉銹病基因的引物序列及其應用，尤其是一種用于篩選小麥抗葉銹病基因的引物序列及其應用。

背景技術

小麥葉銹病是一種世界性病害，對小麥生產會造成嚴重的危害。小麥葉銹病菌適應不同的氣候條件，可在全世界不同的小麥種植區發生，若條件適宜可造成40％甚至更大的產量損失(Knott?1989)。在我國，小麥葉銹病過去主要在西南及長江流域的部分地區如貴州、江西等省發生較重，近年來華北、黃淮麥區也日趨嚴重。在我國1969年、1973年、1975年、1979年和1998年曾幾度大面積流行，造成嚴重減產。利用抗葉銹品種是減輕葉銹病危害的最經濟、有效、快捷的方法。目前已有66個抗葉銹病基因正式命名(McIntosh?et?al.2009)，其中大多數具有生理專化性，這些抗病基因往往會由于病菌小種的變異而很快“喪失”抗性。育種學家和植病學家希望通過利用多基因聚合、基因布局和多系品種來延長苗期抗病基因的抗性壽命。要實現多基因聚合、基因布局和多系品種，必須有豐富的有效抗源，目前已知的有效抗病基因僅有Lr9，Lr19，Lr24和Lr38，因此尋找和發掘新的抗源異常重要。

目前，在尋找和發掘抗源的過程中，分子標記技術使用較為廣泛，特別是在小麥的基因作圖中得到了廣泛應用。分子標記包括RAPD、RFLP、SSR和RGAP，近年來，利用分子標記定位和標記了多個小麥抗葉銹病基因。其中SSR標記由于其多態性高、共顯性、穩定性好及染色體位置清楚而得到了廣泛應用，緊密連鎖的SSR標記可用于標記輔助選擇和聚合育種。在利用分子標記進行抗性篩選和鑒定的過程中，特異性的引物是關鍵。

小麥品種畢麥16由貴州省畢節地區農科所在2004年育成，累積推廣種植面積達20萬公頃，其綜合農藝性狀優良，田間高抗小麥葉銹病和條銹病，苗期高抗我國大多數葉銹菌生理小種(Li?et?al.2006，2010)，可能含有新的抗葉銹基因。進一步通過對畢麥16和Thatcher雜交產生的F₁、F₂和F₃群體用于遺傳分析和基因定位，將抗病基因定位于7BL染色體上，該基因命名為LrBi16，找到了與抗病基因緊密連鎖的SSR標記，可用于標記輔助育種。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種用于篩選小麥抗葉銹病基因的引物序列，用于篩選LrBi16基因。

為解決上述技術問題，本發明所述引物序列包括cfa2257和wms344。

其中引物cfa2257由序列表中其上游序列(20個堿基)和下游序列(25個堿基)組成；引物wms344由序列表中其上游序列(20個堿基)和下游序列(20個堿基)組成，見表1。

表1用于檢測抗葉銹基因的兩引物上下游序列

??引物名稱??上游序列??下游序列??cfa2257??5’GATACAATAGGTGCCTCCGC?3’??5’CCATTATGTAAATGCTTCTGTTTGA?3’??wms344??5’CAAGGAAATAGGCGGTAACT?3’??5’ATTTGAGTCTGAAGTTTGCA?3’

本發明所提供的用于篩選小麥抗葉銹病基因的分子標記分別是cfa2257和gwm344，標記cfa2257由引物cfa2257擴增獲得(188bp)，標記gwm344由引物wms344擴增獲得(185bp)。