[發(fā)明專利]鹿血清的提純方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010123783.4 | 申請日: | 2010-02-07 |
| 公開(公告)號: | CN101773521A | 公開(公告)日: | 2010-07-14 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 董栗;龐秀明;郭盈盈 | 申請(專利權(quán))人: | 董栗 |
| 主分類號: | A61K35/16 | 分類號: | A61K35/16;A61P39/00;A61P37/04;A61P7/06;A23L1/29 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 025450內(nèi)蒙古自治區(qū)赤峰*** | 國省代碼: | 內(nèi)蒙古;15 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 鹿血 提純 方法 | ||
1.一種鹿血清的提純方法,它包括以下幾個步驟:
a.處理凝膠:將葡聚糖凝膠Sephadex?G-25用蒸餾水充分膨脹后備用;
b.裝柱:用脫脂棉花堵在色譜柱的下端,將處理好的凝膠一次性緩慢倒入 色譜柱中,打開色譜柱的活塞,讓凝膠自由沉降,同時用蒸餾水洗脫,凝膠沉 降完畢,待水面高度下降至與凝膠表面基本一致時,關(guān)閉色譜柱活塞,準備加 樣;
c.加樣:用移液槍吸取鹿血清,沿色譜柱環(huán)周壁加入,打開色譜柱活塞, 待鹿血清高度下降至與凝膠表面基本一致時,關(guān)閉色譜柱活塞,準備洗脫;
d.洗脫:用吸管吸取配置好的0.9%NaCl洗脫劑溶液,控制流速為0.18~ 0.4ml/min,沿色譜柱環(huán)周壁加入,打開色譜柱活塞收集流出液;
e.檢測:用雙縮脲試劑檢測收集流出液樣品,樣品中加入雙縮脲試劑呈紫 色,表明有蛋白洗脫下來,繼續(xù)收集流出液,樣品中加入雙縮脲試劑呈無色, 表明沒有蛋白洗脫下來,停止收集;
步驟e使用的雙縮脲試劑的配制方法是:首先,稱定240.0g氫氧化鈉 NaOH,加蒸餾水定容至1000ml,即得6mol/L氫氧化鈉NaOH;然后,稱定2~ 4g五水硫酸銅CuSO4·5H2O,8~10g酒石酸鉀鈉NaKC4H4O6·4H2O,8~10g氯 化鈉NaCl,4~6g碘化鉀KI,5~7mo?l/L氫氧化鈉NaOH?80~120ml,加蒸餾 水定容至1000ml,制得雙縮脲試劑。
2.按照權(quán)利要求1所述的鹿血清的提純方法,其特征在于:鹿血清蛋白 濃度為70~75g/L,在洗脫過程中,控制流速為0.2~0.3ml/min。
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