[發明專利]一種沙棘葉黃酮苷元的生產方法

有效

• 申請號: 201010120811.7
• 申請日: 2010-03-09
• 公開（公告）號: CN101768613A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發明（設計）人: 程永強;李剛;殷麗君;馮淑環;李里特
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06;C12R1/685
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 史雙元

技術領域

本發明涉及黃酮苷元的生產方法，具體涉及一種沙棘葉黃酮苷元的生產方 法，即利用微生物發酵的技術從沙棘葉中獲取黃酮苷元的方法。

背景技術

近年來，很多體內和體外實驗都表明黃酮類化合物有很多的生物功能，包 括抗炎癥、抗過敏、抗癌、抗高血壓、抗關節炎和抗菌活性，降低慢性疾病如 心血管疾病，治療皮膚病，防止血小管凝集抗過敏作用、抗腫瘤等。沙棘葉中 含有豐富的黃酮類物質，其含量遠高于果實中黃酮的含量，并且葉片的低油脂 含量也使得其成為黃酮的優質來源；另一方面，沙棘葉來源廣泛，從未被充分 利用。目前，國內有利用沙棘葉提取黃酮的，但是沒有人關注其產物的構型和 生理活性高低。

通常，黃酮糖苷的生理活性低于黃酮苷元，黃酮苷元比黃酮糖苷具有更高 的生物利用率。人體實驗表明，黃酮主要在腸道中被吸收，脂溶性的苷元可從 小腸直接吸收；糖苷型的黃酮小部分可以通過結腸中的細菌、微生物的β-葡萄 糖苷酶或β-半乳糖苷酶作用而水解，生成的產物又進一步被細胞降解，生成苷 元，被結腸壁吸收入血，大部分被腸腔內微生物通過雜環裂解方式降解和代謝 而損失掉。即黃酮苷元比黃酮糖苷具有更高的生物效價。有研究表明，在人體 內，苷元型的大豆異黃酮比糖苷型吸收更快，被吸收量更多。另外，由于黃酮 苷元更容易被吸收，其各種生物活性功能也更強。高榮海等發現小鼠對大豆異 黃酮苷元吸收效果強于大豆異黃酮糖苷，大豆異黃酮苷元免疫功能優于大豆異 黃酮糖苷。因此，生產黃酮苷元具有更為明顯的意義。

所謂微生物轉化是利用微生物細胞中的酶高效地、選擇性地催化一種化學 成分進行某種化學反應，以獲得具有高活性成分的過程。利用微生物發酵液中 的代謝酶轉化糖苷型黃酮為苷元形式的黃酮不僅可以降低成本，而且具有反應 條件溫和，大豆異黃酮苷元不易變性等優點，因此成為近年來許多學者研究的 熱點之一。

目前研究最多的是大豆異黃酮，大豆制品發酵過程中能分泌β-葡萄糖苷酶 的微生物，主要是曲霉、根霉、毛霉和酵母等真菌，尤其是根霉屬(吳定，江漢 湖，發酵大豆制品中異黃酮形成及其功能，中國調味品，2001(6)：3-6)。申請號 為200610134132.9、發明名稱為微生物酶法制備大豆異黃酮苷元的方法的專利 申請中以大豆異黃酮粉為原料，用培養米曲霉菌發酵制備的β-葡萄糖苷酶能使 大豆異黃酮苷轉化率達到90％以上，生物利用率明顯提高。王振麗(王振麗， 利用微生物代謝酶轉化大豆異黃酮的研究，沈陽農業大學，2007)篩選了產胞 外β-葡萄糖苷酶活力較高的菌株LWQ-0508。王秀伶等(王秀伶，邵建柱，朱 寶成等，大豆異黃酮微生物轉化菌株的篩選與鑒定，河北農業大學，2006)以 氫黃豆苷元為底物，分離出了能轉化二氫黃豆苷為100％S-型雌馬酚的革蘭氏 陰性細菌菌株。在其他黃酮類化合物的轉化方面，申請號為03153489.9、發明 名稱為銀杏黃酮甙元的生產方法的專利申請公開了一種銀杏黃酮苷元的生產方 法，采用微生物菌株或生物酶作用原料中黃酮糖苷的生物轉化技術提高產物中 黃酮苷元含量。

在其它天然化合物的生物轉化方面，研究也十分活躍。目前有通過酶的作 用對沙棘黃酮進行構型轉化，但是酶解法轉化中催化劑是昂貴的糖苷水解酶， 成本高，不利于工業化生產。因此應該更多考慮微生物進行轉化。微生物在常 溫、常壓等較為溫和的條件下進行糖苷的轉化，能最大限度保護原料中化學成 分免遭破壞，為綠色環保技術，能夠在最小成本下獲得最大利益。但是，目前 尚未見關于沙棘黃酮微生物發酵轉化的研究報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種沙棘葉黃酮苷元的生產方法，利用微生物轉化 技術提高苷元型沙棘黃酮的含量，從而提高沙棘黃酮的生理活性和最終產品中 苷元型黃酮的含量。本發明利用黑曲霉對沙棘葉黃酮進行轉化，即利用黑曲霉 代謝產生的聚乳糖醛酸酶等對糖苷型黃酮進行酶解，最后生成槲皮素、山奈酚 和異鼠李素等黃酮苷元。本發明所采用的為食源性微生物，轉化產物可以直接 用于食品。

一種沙棘葉黃酮苷元的生產方法，按照如下操作步驟進行：