[發明專利]非金屬膠體粒子免疫分析試劑及分析方法

有效

• 申請號: 201010118968.6
• 申請日: 2010-03-08
• 公開（公告）號: CN102192980A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發明（設計）人: 李紀陽
• 申請（專利權）人: 蘇州浩歐博生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/543;G01N33/532;G01N33/76
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 孫仿衛

技術領域

本發明屬于診斷免疫分析技術領域。

背景技術

已知的很多診斷免疫分析方法主要是利用帶有可追蹤標記的特異性抗體能夠與分析物特異性結合的特性來檢測分析物的含量，例如放射免疫分析法(RIA)、自由基檢測技術(FRAT)、酶聯免疫技術(EIA)、免疫熒光技術以及金屬溶膠顆粒檢測分析物的方法(專利申請號為4313734的美國專利中介紹了該方法)。

現有技術中，上述的這些方法都在使用，都能夠有效檢測一些特定的分析物，但是上述這些方法都存在一些弊端，例如，放射免疫分析法雖然靈敏度高，但是需要使用有放射性的化合物，操作危險，對操作者的健康不利，并且也需要使用靈敏度高的儀器，成本較高。酶聯免疫技術應用很普遍，但是其檢測的靈敏度不高，無法檢測含量低的免疫原。免疫熒光技術也同樣存在這樣的問題，靈敏度低。另外，自由基檢測技術以及金屬膠體的免疫分析方法，不僅檢測的靈敏度偏低，并且較難對最后形成的復合物進行定量分析。

因此，需要提供一種新的診斷免疫分析方法，該方法檢測的靈敏度高，且對最后形成復合物的定量分析更為精準。

發明內容

本發明的一方面提供了一種免疫分析試劑，該試劑由非金屬膠體粒子與能夠特異性結合所述待分析物質的免疫組分結合形成。

本發明另一方面提供了一種免疫分析方法，該方法采用上述免疫分析試劑來檢測樣品中的待分析物質的含量，該方法包括如下依次進行的步驟：1)將樣品與所述免疫分析試劑接觸；2)通過檢測待分析物質與所述免疫分析試劑形成的免疫復合物的含量，從而確定待分析物質的含量；所述免疫分析試劑由非金屬膠體粒子與能夠特異性結合所述待分析物質的免疫組分結合形成。

上述免疫分析試劑及方法，利用標記了非金屬膠體粒子的免疫組分特異性結合待分析物質，對最終形成的復合物進行定量分析從而檢測出該分析物質的含量。

其中，免疫組分是指能夠特異性結合待分析物質的組分。免疫組分與待分析物質之間發生免疫反應而結合，具體的說，樣品中的待分析物質與免疫組分特異性結合。優選的，所述的免疫組分為特異性結合蛋白。更優選的，所述的免疫組分選自抗原、半抗原或抗體。

優選的，所述的非金屬膠體粒子選自硫、硒、碲膠體粒子。在本發明的一個實施方案中，所述的非金屬膠體粒子為水分散形式的硒膠體粒子。

優選的，所述的非金屬膠體粒子的平均粒徑為3nm～450nm。在本發明的一個實施方案中，所述的硒膠體粒子的平均粒徑為11nm～200nm。

在本發明的一個實施方案中，使用的硒膠體粒子為水分散的形式，濃度為0.005％～0.1％(W/V)；濃度優選0.02％～0.04％。在本發明的一個實施方案中，硒膠體粒子的形狀大致呈球形，長與寬的比例在0.7～0.95之間。

優選的，非金屬膠體粒子與免疫組分的結合方式可以為物理固定、共價鍵或親水鍵結合。

上述的待分析物質可以是抗體、抗原、半抗原。

本發明的免疫分析試劑及方法還可以用來檢測分子量較高的大分子物質，例如多肽、蛋白質、抗原、半抗原以及抗體；或激素、維生素、藥物、代謝物；或類固醇、維生素。

采用本發明的免疫分析試劑及方法檢測液體樣品，如尿、血液、血清、唾液及其類似物，可以將樣品與免疫分析試劑相混合，經過適當時間的孵育后，檢測待分析物質與免疫分析試劑是否形成了免疫復合物或形成的免疫復合物的含量，由此可以獲得待分析物質的含量。

免疫復合物的含量可以通過測量光吸收值的方法來檢測。測量光吸收值的常規方法有很多，例如本領域技術人員所熟知的分光光度法。在本發明的一個具體實施方式中，采用了固相免疫分析方法，特別適合本發明的非金屬膠體粒子免疫分析方法。

本發明的免疫分析試劑和方法并不局限于上述部分中所列舉的，凡根據本發明的精神實質所作的等效變化或修飾，都應涵蓋在本發明的保護范圍內，例如，可以在上述的免疫分析試劑和方法基礎上適當的進行改進，檢測多種特異性結合物。

采用本發明的非金屬膠體粒子免疫分析試劑和方法，由于其中采用了標記非金屬膠體粒子的方式，與現有的免疫分析方法相比，一方面靈敏度更高，能夠檢測出更低含量的物質，另一方面，最后形成的免疫復合物的檢測光吸收值的波長范圍更廣，在免疫復合物的定量分析上更為精確。

附圖說明

附圖1為實施例1中所獲得免疫復合物的定量分析結果。

具體實施方式

以下結合實施例來進一步闡述本發明的非金屬膠體粒子免疫分析試劑和方法。

實施例1

硒膠體粒子的制備