[發(fā)明專利]非金屬膠體粒子免疫分析試劑及分析方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010118968.6
• 申請日: 2010-03-08
• 公開（公告）號: CN102192980A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李紀(jì)陽
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州浩歐博生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/543;G01N33/532;G01N33/76
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 孫仿衛(wèi)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于診斷免疫分析技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

已知的很多診斷免疫分析方法主要是利用帶有可追蹤標(biāo)記的特異性抗體能夠與分析物特異性結(jié)合的特性來檢測分析物的含量，例如放射免疫分析法(RIA)、自由基檢測技術(shù)(FRAT)、酶聯(lián)免疫技術(shù)(EIA)、免疫熒光技術(shù)以及金屬溶膠顆粒檢測分析物的方法(專利申請?zhí)枮?313734的美國專利中介紹了該方法)。

現(xiàn)有技術(shù)中，上述的這些方法都在使用，都能夠有效檢測一些特定的分析物，但是上述這些方法都存在一些弊端，例如，放射免疫分析法雖然靈敏度高，但是需要使用有放射性的化合物，操作危險，對操作者的健康不利，并且也需要使用靈敏度高的儀器，成本較高。酶聯(lián)免疫技術(shù)應(yīng)用很普遍，但是其檢測的靈敏度不高，無法檢測含量低的免疫原。免疫熒光技術(shù)也同樣存在這樣的問題，靈敏度低。另外，自由基檢測技術(shù)以及金屬膠體的免疫分析方法，不僅檢測的靈敏度偏低，并且較難對最后形成的復(fù)合物進(jìn)行定量分析。

因此，需要提供一種新的診斷免疫分析方法，該方法檢測的靈敏度高，且對最后形成復(fù)合物的定量分析更為精準(zhǔn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一方面提供了一種免疫分析試劑，該試劑由非金屬膠體粒子與能夠特異性結(jié)合所述待分析物質(zhì)的免疫組分結(jié)合形成。

本發(fā)明另一方面提供了一種免疫分析方法，該方法采用上述免疫分析試劑來檢測樣品中的待分析物質(zhì)的含量，該方法包括如下依次進(jìn)行的步驟：1)將樣品與所述免疫分析試劑接觸；2)通過檢測待分析物質(zhì)與所述免疫分析試劑形成的免疫復(fù)合物的含量，從而確定待分析物質(zhì)的含量；所述免疫分析試劑由非金屬膠體粒子與能夠特異性結(jié)合所述待分析物質(zhì)的免疫組分結(jié)合形成。

上述免疫分析試劑及方法，利用標(biāo)記了非金屬膠體粒子的免疫組分特異性結(jié)合待分析物質(zhì)，對最終形成的復(fù)合物進(jìn)行定量分析從而檢測出該分析物質(zhì)的含量。

其中，免疫組分是指能夠特異性結(jié)合待分析物質(zhì)的組分。免疫組分與待分析物質(zhì)之間發(fā)生免疫反應(yīng)而結(jié)合，具體的說，樣品中的待分析物質(zhì)與免疫組分特異性結(jié)合。優(yōu)選的，所述的免疫組分為特異性結(jié)合蛋白。更優(yōu)選的，所述的免疫組分選自抗原、半抗原或抗體。

優(yōu)選的，所述的非金屬膠體粒子選自硫、硒、碲膠體粒子。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述的非金屬膠體粒子為水分散形式的硒膠體粒子。

優(yōu)選的，所述的非金屬膠體粒子的平均粒徑為3nm～450nm。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述的硒膠體粒子的平均粒徑為11nm～200nm。

在本發(fā)明的一個實施方案中，使用的硒膠體粒子為水分散的形式，濃度為0.005％～0.1％(W/V)；濃度優(yōu)選0.02％～0.04％。在本發(fā)明的一個實施方案中，硒膠體粒子的形狀大致呈球形，長與寬的比例在0.7～0.95之間。

優(yōu)選的，非金屬膠體粒子與免疫組分的結(jié)合方式可以為物理固定、共價鍵或親水鍵結(jié)合。

上述的待分析物質(zhì)可以是抗體、抗原、半抗原。

本發(fā)明的免疫分析試劑及方法還可以用來檢測分子量較高的大分子物質(zhì)，例如多肽、蛋白質(zhì)、抗原、半抗原以及抗體；或激素、維生素、藥物、代謝物；或類固醇、維生素。

采用本發(fā)明的免疫分析試劑及方法檢測液體樣品，如尿、血液、血清、唾液及其類似物，可以將樣品與免疫分析試劑相混合，經(jīng)過適當(dāng)時間的孵育后，檢測待分析物質(zhì)與免疫分析試劑是否形成了免疫復(fù)合物或形成的免疫復(fù)合物的含量，由此可以獲得待分析物質(zhì)的含量。

免疫復(fù)合物的含量可以通過測量光吸收值的方法來檢測。測量光吸收值的常規(guī)方法有很多，例如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的分光光度法。在本發(fā)明的一個具體實施方式中，采用了固相免疫分析方法，特別適合本發(fā)明的非金屬膠體粒子免疫分析方法。

本發(fā)明的免疫分析試劑和方法并不局限于上述部分中所列舉的，凡根據(jù)本發(fā)明的精神實質(zhì)所作的等效變化或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，例如，可以在上述的免疫分析試劑和方法基礎(chǔ)上適當(dāng)?shù)倪M(jìn)行改進(jìn)，檢測多種特異性結(jié)合物。

采用本發(fā)明的非金屬膠體粒子免疫分析試劑和方法，由于其中采用了標(biāo)記非金屬膠體粒子的方式，與現(xiàn)有的免疫分析方法相比，一方面靈敏度更高，能夠檢測出更低含量的物質(zhì)，另一方面，最后形成的免疫復(fù)合物的檢測光吸收值的波長范圍更廣，在免疫復(fù)合物的定量分析上更為精確。

附圖說明

附圖1為實施例1中所獲得免疫復(fù)合物的定量分析結(jié)果。

具體實施方式

以下結(jié)合實施例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明的非金屬膠體粒子免疫分析試劑和方法。

實施例1

硒膠體粒子的制備