[發明專利]一種具有肝靶向功能的四氧化三鐵納米粒子的制備方法

無效

• 申請號: 201010116592.5
• 申請日: 2010-03-03
• 公開（公告）號: CN101766826A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發明（設計）人: 查瑞濤;馬靜;王立軍
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: A61K49/12
• 分類號: A61K49/12;A61K49/06
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種四氧化三鐵納米粒子的制備方法，尤其是一種具有肝靶向功能的四氧化三鐵納米粒子的的制備方法，屬于生物醫學工程領域。

背景技術

20世紀80年代中期，基于肝臟的諸多功能和特殊組成成份，研究人員開始尋找能在肝組織內滯留時間更長、以肝臟組織細胞為特殊靶器官、同時又不被肝臟生物攝取的肝臟特異性對比劑。國內武漢大學、蘭州大學、南方醫科大學、華東師范大學、華中科技大學等單位在這方面做了很多不錯的工作，主要集中在Gd水溶性聚合物的合成和超順磁性氧化鐵(SPIO，superparamagnetic?iron?oxide)被動靶向納米粒子表面包覆層的制備。

SPIO對比劑具有很好的肝臟造影效果，商品名叫做菲立磁。SPIO對比劑通過肝臟吞噬細胞的吞噬作用來實現對肝臟特異性診斷，實現很好的被動靶向作用。SPIO注射劑量的80％以上可以分布于肝，檢出特異度可高達99％。SPIO不僅有助于提高肝臟微小瘤灶的MRI檢出水平，也有助于對良性、惡性腫瘤作出定性判斷，還提高了肝炎、肝硬化等彌散性肝病的檢出敏感性。大量動物實驗和臨床研究表明，SPIO能成功地檢出以往未能檢出的微小病灶，進一步提高了惡性病灶的檢出率。SPIO粒子可有效地縮短組織的T₂值，使組織信號降低，提供較長的掃描時間窗(1-4h)，而且SPIO粒子在被吞噬細胞吞噬后，運送到溶酶體分解，成為機體內的儲備鐵，釋放的鐵可與血紅蛋白結合。雖然SPIO具有很高的肝臟顯影效果，但由于其價格昂貴，在快速注射時有很明顯的副反應，臨床試驗報道的副作用發生率達6.1％-15％，現在國內使用SPIO的已經很少。SPIO副作用的產生原因尚不清楚，有學者指出可能與巨噬細胞的調理素有關，需進一步研究。目前關于SPIO的研究仍主要集中在聚合物包覆方面，通過改變粒子的粒徑和表面電荷來降低其毒副作用，其作用機理仍是被動靶向作用。有研究者以單克隆抗體或RGD肽為靶向基團，修飾超順磁性氧化鐵進行肝臟疾病的診斷，研究結果表明，通過抗體或肽類化合物的主動靶向作用，可以明顯降低其毒副作用。但抗體和肽類化合物修飾效率較低，成本昂貴，難以大規模應用。而且目前的抗體主要是鼠源性抗體，安全性成為其首要問題。文獻中關于采用小分子化合物受體介導的SPIO肝靶向的研究報道不多。值得一提的是以上文獻中報道的方法所制備的納米粒子都缺乏對于病灶部位的特異性，進而限制了他們在動物體內的應用。

隨著人們對肝臟早期病變診斷要求的提高和對現在使用的MRI對比劑毒副作用的深入了解，MRI對比劑在動物體內的分布規律和肝特異性識別研究顯得尤為重要和迫切，提高MRI敏感性和特異靶向性是核磁共振對比劑研發中面臨的重大挑戰。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服已有技術的不足，目的在于提供一種具有肝靶向功能的四氧化三鐵納米粒子的制備方法。

本發明通過以下技術方案實現上述目的：

一種具有肝靶向功能的四氧化三鐵納米粒子的制備方法，是將采用的技術路線是利用肝靶向化合物和葡聚糖反應制備肝靶向化合物修飾的葡聚糖，并與鐵鹽和亞鐵鹽水溶液反應制備具有肝靶向功能的四氧化三鐵納米粒子的制備方法。

所述肝靶向化合物為單甘草次酸乙二胺、單甘草次酸丙二胺、單甘草次酸丁二胺、單甘草次酸己二胺、單膽酸乙二胺、單膽酸丙二胺、單膽酸丁二胺和單膽酸己二胺中的任意一種；

所述葡聚糖的分子量為2000～4×10⁴；

所述鐵鹽為氯化鐵和醋酸鐵中的任意一種；

所述亞鐵鹽為氯化亞鐵和醋酸亞鐵中的任意一種；

所述亞鐵鹽和鐵鹽的配料比為1∶2～3，mol/mol。

具有肝靶向功能的四氧化三鐵納米粒子的制備方法包括下述步驟：

1.在2～10％的葡聚糖的水溶液中，加入高碘酸鈉水溶液，攪拌下反應4～6h，冷卻后，將反應液在蒸餾水中透析2～12h，得到氧化的葡聚糖溶液；將肝靶向化合物的水溶液滴加到氧化的葡聚糖溶液中，在25～60℃反應4～6小時，冷卻后，加入硼氫化鈉的水溶液，繼續攪拌反應2～4h，將反應液在蒸餾水中透析2～12h后，加入乙醚沉淀，真空干燥，得到肝靶向化合物修飾的葡聚糖。

所述肝靶向化合物修飾的葡聚糖的合成步驟中的物料配比為：葡聚糖∶高碘酸鈉∶硼氫化鈉為100.0∶3.0～20.0∶0.50～3.60，g/g；肝靶向化合物∶硼氫化鈉為1∶1～3，mol/mol。