[發明專利]拮抗疫苗中內毒素對畜禽的致熱性作用的組合物及其應用

有效

• 申請號: 201010113882.4
• 申請日: 2010-02-25
• 公開（公告）號: CN101732703A
• 公開（公告）日: 2010-06-16
• 發明（設計）人: 白同臣;甘一迪;付麗杰;吳金;姜力;丁國杰;馬世華;曲海波
• 申請（專利權）人: 哈藥集團生物疫苗有限公司
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02;A61K39/116;A61K38/12;A61P29/00;A61K31/198
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

技術領域

本發明涉及一種拮抗內毒素致熱性作用的組合物，尤其涉及一種 拮抗革蘭氏陰性菌疫苗中內毒素對畜禽的致熱性作用的組合物，本發 明屬于獸藥技術領域。

背景技術

內毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁上一種大分子有機化合物，主要成 分為脂多糖，其結構具有高度的穩定性，160℃需2-4小時才能滅活。

革蘭氏陰性菌疫苗在生產過程中常出現因配制工藝或是抗生素 對動物的不當應用引起菌體崩解，導致內毒素釋放，使注射動物出現 一系列臨床反應，諸如：腫頭，腫臉，停食停水，局部炎癥，休克， 死亡；生產性能降低；免疫功能下降，易發病，對疫苗應答下降等。

多粘菌素B(PMB)是一種環形陽離子多肽，被認為是惟一具有 抗內毒素作用的抗生素，多粘菌素B與LPS的活性中心Lipid?A具有 很高的親和力，直接與Lipid?A的SO4^2-結合，抑制LPS的生物活性， 發揮對內毒素的中和作用。

甘氨酸(Gly)是機體固有的最簡單的氨基酸，具有兩性游離的 特點，通過其氨基與內毒素結合而改變了內毒素正常結構，也可抑制 內毒素誘導的IL-1、TNF的分泌，降低內毒素與單核細胞的結合率。

有研究報道甘氨酸(Gly)能顯著拮抗內毒素的致熱性等，能在 一定程度上破壞內毒素的超微結構，從而干擾其活性；而多粘菌素B (PMB)是有效的內毒素拮抗劑。但是，將多粘菌素B和甘氨酸聯合 在一起對于革蘭氏陰性菌疫苗中的內毒素對畜禽的致熱性作用是否 有協同增效的拮抗效果？其安全性如何？迄今為止，尚沒有任何文獻 對此進行披露。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種能夠有效拮抗革蘭氏陰性菌疫苗 中的內毒素對畜禽的致熱性作用的組合物；

本發明的目的之二是將上述組合物應用于拮抗革蘭氏陰性菌疫 苗中的內毒素對畜禽的致熱性作用；

本發明的上述目的是通過以下技術方案來實現的：

一種能夠有效拮抗革蘭氏陰性菌疫苗中的內毒素對畜禽的致熱 性作用的組合物，該組合物由多粘菌素B和甘氨酸組成；優選的，該 組合物中，多粘菌素B的濃度為200μg/ml，甘氨酸的濃度為 200mg/ml。

本發明通過試驗發現，多粘菌素B(PMB)和甘氨酸(Gly)分別 作用于內毒素分子結構中的不同部位，二者聯合應用具有較強的內毒 素結合和中和能力，能夠有效拮抗仔豬水腫病多價滅活疫苗的內毒素 對于內毒素的拮抗作用，具有協同增效的拮抗效果；此外，兩種拮抗 劑同時應用，還可因減少單一拮抗劑的用量而降低藥物的毒副作用。

本發明的另一目的是將本發明組合物應用于拮抗疫苗中的內毒 素對畜禽的致熱性作用，包括：將本發明組合物加入到疫苗中，混合 均勻；

為了達到更好的拮抗效果，優選的，將本發明組合物加入到疫苗 中至每毫升疫苗中含有多粘菌素B?2-4μg和甘氨酸20-40mg；

更優選的，將本發明組合物加入到疫苗中至每毫升疫苗中含有多 粘菌素B?2μg和甘氨酸20mg。

本發明以小鼠為模型，觀察甘氨酸(Gly)與多粘菌素B(PMB) 聯用于疫苗后小鼠的臨床表現和致死性影響，并確定PMB和Gly聯合 拮抗疫苗內毒素上述的最佳配合比例，二者采用上述的最佳比例聯用 時能夠最為顯著的協同拮抗疫苗中內毒素對畜禽的致熱性作用。

本發明中所述的疫苗優選為含菌數不低于300×10⁸CFU/ml的革 蘭氏陰性菌疫苗，更優選為仔豬水腫病多價滅活疫苗。

附圖說明

圖1PMB+Gly聯用對仔豬的安全性比對試驗結果。

具體實施方式

下面結合具體實施例來進一步描述本發明，本發明的優點和特點 將會隨著描述而更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發 明的范圍構成任何限制。本領域技術人員應該理解的是，在不偏離本 發明的精神和范圍下可以對本發明技術方案的細節和形式進行修改 或替換，但這些修改和替換均落入本發明的保護范圍內。

試驗例1?PMB+Gly聯用對小鼠毒性的觀察試驗

一、多粘菌素B與甘氨酸的配制

滅菌生理鹽水配制儲存濃度為200μg/ml的多粘菌素B和 200mg/ml的甘氨酸，分別用0.22μm的濾膜過濾，置于4℃保存。