[發明專利]抗腫瘤的核酸與多肽及其應用

無效

• 申請號: 201010110980.2
• 申請日: 2010-01-29
• 公開（公告）號: CN102140473A
• 公開（公告）日: 2011-08-03
• 發明（設計）人: 何明亮;孔祥復;董琦;陳纓
• 申請（專利權）人: 香港中文大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C07K14/47;A61K48/00;A61K38/17;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，具體涉及抑制腫瘤的多肽藥物及其應用。

背景技術

抗腫瘤藥物是長久以來被廣泛關注和研究的熱點問題之一。目前對腫瘤或癌癥的治療，通常是采用手術治療結合放療和化療的綜合療法。放射線和化療藥導致細胞凋亡，從而殺傷腫瘤細胞。高劑量的放療和化療藥物可以破壞或消滅癌細胞，但同時也損害正常細胞，使患者免疫功能下降，對人體造成一系列毒副作用。

多肽藥物是目前生物醫藥領域最具成長性的嶄新領域，以其高效、安全、特異性強等特點逐漸用于癌癥，傳染病等預防和治療。基因的功能最終要通過其表達產物——蛋白質來實現，生物體的一切活動或功能都離不開蛋白質的物質基礎。發現和鑒定具有重要功能的蛋白質，可為新藥的開發帶來決定性的影響。在全球范圍內，據初步統計，現有的大約65個肽類藥物，市場規模約為200億美元，并且每年以15％～20％的速度遞增。

多肽藥物目前在傳染病方面，特別是病毒類的疾病，如艾滋病(HIV)的防治中取得了進展。現已經開發出Enfuvirtide(T20)多肽藥物¹，其能阻止HIV與T細胞等免疫細胞的接觸融合，干擾HIV-1進入T細胞，防止艾滋病患者的免疫系統遭受病毒破壞來發生作用，現已作為常規抗愛滋病藥物，治療效果很好。我們的一項研究證明，多肽藥物與病毒囊膜糖蛋白相互作用，阻止其構象變化，從而阻斷病毒囊膜與宿主細胞膜的融合并將其基因組注入宿主細胞進行復制，以達到防治病毒感染的目的²。1997年由我國第一個人工合成的多肽類新藥″注射用胸腺五肽″正式上市，該新藥具有免疫雙向調節功能。總之，與其它藥品相比，多肽藥物具備高效、低毒和特異性強的顯著優勢。

T-box基因家族編碼是在多種動物的發育中發揮重要作用的轉錄因子家族。它們以具有高度保守的DNA結合區(T區)為特征，能與靶基因的啟動子的特異序列相結合。T-box基因家族包括多個亞族，其中TBX2與TBX3同屬于TBX2亞族。在DNA結合區域，TBX2與TBX3有90％的序列是相同的。已經證實，TBX2與TBX3在許多組織中重疊表達，主要參與p19ARF-p53(人類為p14ARF)途徑等信號轉導，來調節細胞周期與細胞凋亡。

多家實驗室的研究發現，在腫瘤組織(包括結腸癌，肝癌，乳腺癌，卵巢癌等)中TBX2/TBX3基因高表達^{3，4，5，6}，同時又發現其高表達導致現有的抗腫瘤藥物無效⁷。

發明內容

第一方面，本發明提供了編碼具有抗腫瘤活性的多肽的核酸分子，該核酸分子包含SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列或者在嚴緊雜交條件下與SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。

在優選實施方案中，所述核酸分子包含或由SEQ?ID?NO：1所示的核酸序列組成。在另一優選的實施方案中，所述核酸分子含有TBX2和/或TBX3基因中與腫瘤相關的結構域或其部分。

第二方面，本發明提供了由本發明的核酸分子編碼的多肽。在優選的實施方案中，所述多肽是本發明的核酸分子表達產生的稱為TAP21的多肽。

第三方面，本發明提供了包含SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列的多肽或與其具體相同功能的變體或衍生物，所述多肽、其變體或衍生物具有抗腫瘤的活性。

在優選實施方案中，所述多肽包含SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列或由SEQ?ID?NO：2組成。

第四方面，本發明提供重組載體，其包含與本發明的核酸分子可操作連接的載體。

在一實施方案中，所述載體是適于表達本發明的核酸分子的表達載體。

在另一實施方案中，本發明的核酸分子包含SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列或者在嚴緊雜交條件下與SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。

第五方面，本發明提供了用本發明的核酸分子或載體轉染或轉化的宿主。

在一實施方案中，所述宿主是用本發明的核酸分子或載體轉染或轉化的細胞。

在另一實施方案中，本發明的核酸分子包含SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列或者在嚴緊雜交條件下與SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。

第六方面，本發明提供了藥物或藥物組合物，其包含本發明的核酸分子、多肽、載體或其藥物可接受的鹽，以及賦形劑或藥用載體。

在一實施方案中，所述多肽是由本發明的核酸分子編碼的多肽，或是包含SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列的多肽、或是與其具體相同功能的變體或衍生物。所述多肽、其變體或衍生物具有抗腫瘤的活性。