[發(fā)明專利]一種制備β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶酶制劑的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201010110215.0 | 申請(qǐng)日： | 2010-02-20 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN101845424A | 公開（公告）日： | 2010-09-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 谷海先;張偉;許建立;畢建成 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中諾生物科技發(fā)展江蘇有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N9/38 | 分類號(hào)： | C12N9/38;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 關(guān)暢 |
| 地址： | 224300 江蘇省鹽*** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 制備 半乳糖 水解 酶制劑 方法 | ||
1.一種制備酶制劑的方法，包括如下步驟：
1)將含目的酶的發(fā)酵液進(jìn)行微孔膜過濾，得到含目的酶的澄清液；
2)將所述含目的酶的澄清液依次通過超濾柱組1和超濾柱組2，收集目的酶液；
所述超濾柱組1和所述超濾柱組2沿著含目的酶的澄清液的流動(dòng)方向串聯(lián)連接；所述超濾柱組1和超濾柱組2均至少含有一支超濾柱；
所述超濾柱由壁卷成；所述壁由至少二層超濾膜和至少一層導(dǎo)流網(wǎng)組成，超濾膜和導(dǎo)流網(wǎng)相間排列，每層導(dǎo)流網(wǎng)均夾設(shè)在兩層超濾膜之間；所述含目的酶的澄清液沿所述導(dǎo)流網(wǎng)流動(dòng)；
所述超濾柱組1中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為24密爾-46密爾，所述超濾柱組2中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為54密爾-86密爾；
3)向所述目的酶液中加入助劑，干燥，得到目的酶制劑；
所述步驟1)和步驟2)在密閉條件下進(jìn)行。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述超濾柱組1中含有3支所述超濾柱，且3支所述超濾柱沿含目的酶的澄清液的流動(dòng)方向串聯(lián)連接；和所述超濾柱組2中含有3支所述超濾柱，且3支所述超濾柱沿含目的酶的澄清液的流動(dòng)方向串聯(lián)連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述超濾柱組1含有12支所述超濾柱，其中每3支沿含目的酶的澄清液的流動(dòng)方向串聯(lián)形成一小組，共形成4小組，4小組并聯(lián)形成超濾柱組1；和所述超濾柱組2含有12支所述超濾柱，其中每3支沿含目的酶的澄清液的流動(dòng)方向串聯(lián)形成一小組，共形成4小組，4小組并聯(lián)形成超濾柱組2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的方法，其特征在于：所述超濾柱組1中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為24密爾，所述超濾柱組2中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為54密爾；
或所述超濾柱組1中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為35密爾，所述超濾柱組2中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為60密爾；
或所述超濾柱組1中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為46密爾，所述超濾柱組2中的各超濾柱中的每層導(dǎo)流網(wǎng)的厚度均為86密爾。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述超濾柱組1中每支所述超濾柱中各層超濾膜的總面積為28m2-31m2，具體為30m2、32m2或28m2；所述超濾柱組2中每支所述超濾柱中各層超濾膜的總面積為24m2-27m2，具體為26m2、27m2或24m2。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述超濾柱組1中每支所述超濾柱和所述超濾柱組2中每支所述超濾柱均沿含目的酶澄清液的流動(dòng)方向長(zhǎng)0.5m或1m；所述超濾柱組1中每支所述超濾柱和所述超濾柱組2中每支所述超濾柱的橫截面的外直徑均為2英寸或8英寸；所述超濾柱組1中每支所述超濾柱的壁中和所述超濾柱組2中每支所述超濾柱的壁中的超濾膜均為3-4層、和導(dǎo)流網(wǎng)均為2-3層。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述超濾柱組1中每支所述超濾柱的平均通透量為40-52升/m2/h，具體為40升/m2/h、45升/m2/h或52升/m2/h；和所述超濾柱組2中每支所述超濾柱的平均通透量為30-35升/m2/h，具體為30升/m2/h、32升/m2/h或35升/m2/h；和所述超濾膜的截留分子量為1-3萬(wàn)道爾頓，優(yōu)選為2萬(wàn)道爾頓。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述超濾膜帶孔；和所述超濾膜的孔分布均勻；和所述超濾膜的孔徑大小均一；和所述將含目的酶的澄清液直接依次通過超濾柱組1和超濾柱組2，在外界壓力下進(jìn)行；和外界壓力大小恒定，外界壓力大小為1Mpa。
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