[發明專利]生物催化法生產他汀類藥物中間體

有效

• 申請號: 201010107481.8
• 申請日: 2010-01-30
• 公開（公告）號: CN101805756A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發明（設計）人: 鄭裕國;董華平;沈寅初
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12P7/42
• 分類號: C12P7/42;C12P7/40;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

1.一種生物催化法生產他汀類藥物中間體(R)-3-羥基戊二酸乙酯或其羥 基取代衍生物的方法，所述方法如下：

（1）將紅平紅球菌CCTCC?No：M?209244或CCTCC?No：M?209194接 種至發酵培養基，30℃下振蕩培養1~3天，獲得含有含酶菌體細胞的發 酵液；每升發酵培養基組成為：葡萄糖20g，蛋白胨10?g，己內酰胺 1?g，K₂HPO_4?0.5?g，MgSO₄·7H₂O?0.2g，溶劑為水，pH?7.0；

（2）步驟（1）發酵液離心，取沉淀以生理鹽水洗滌1~3次，得到的菌 體細胞用10~50?mmol/L、?pH?6~9的Tris-HCl緩沖液或磷酸鹽緩沖 液配制成1~10?g?DCW/L的菌懸液；

（3）取步驟（2）菌懸液，加入底物化合物（Ⅱ）至濃度為1~20mmol /L，于30℃下進行轉化反應，反應結束后，反應液離心，取上清液用 1~10mol/L的HCl溶液調pH為2~4，再用乙酸乙酯或正己烷萃取1~5次， 合并有機相，減壓蒸餾蒸去乙酸乙酯或正己烷，得到相應的?式（Ⅰ ）所示(R)-3-羥基戊二酸乙酯或其羥基取代衍生物；

各組反應底物（Ⅱ）和對應的產物（Ⅰ）結構如下表所示：

。

2.紅平紅球菌（Rhodococcus?erythropolis?）ZJB-0910，保藏于中國 典型培養物保藏中心，地址：中國?武漢?武漢大學，430072，保藏 編號CCTCC?No：M?209244，保藏日期：2009年10月26日。