[發(fā)明專利]以納米乳劑為佐劑的流感病毒疫苗及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010103495.2
• 申請日: 2010-02-01
• 公開（公告）號: CN101843901A
• 公開（公告）日: 2010-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李映波;畢湖冰;陳芹芹
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/145;A61P31/16
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責(zé)任公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種流感病毒疫苗，具體涉及以納米乳劑為佐劑的流感病毒疫苗及其制備方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

技術(shù)背景

流行性感冒簡稱流感，是由流感病毒引起的急性呼吸道感染，主要通過飛沫或人與人密切接觸傳播。流感傳染性強(qiáng)、流行快、變異迅速，能夠引起多種嚴(yán)重的并發(fā)癥并導(dǎo)致較高的死亡率，已對世界公共衛(wèi)生安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅。根據(jù)流感的流行特點(diǎn)，可將其分為季節(jié)性流感和大流行流感。季節(jié)性流感多發(fā)于冬季，引起季節(jié)性流感的病毒通常已存在于人群中，對人體免疫系統(tǒng)而言并非是首次接觸，所以危害性較小。但是流感病毒一旦突變或者跨越物種而從其他動物感染給人類，則容易造成大流行流感。自2009年首次在美洲出現(xiàn)甲型H1N1流感流行以來，甲型H1N1流感已經(jīng)在世界各國迅速流行，在數(shù)月間世界衛(wèi)生組織(WHO)就將甲型H1N1流感警戒級別提高為6級，代表全球性流感大流行的發(fā)作。目前防止流感最有效的手段就是接種流感疫苗。每年WHO會根據(jù)全球流感流行情況選擇流行毒株并提供給各研究機(jī)構(gòu)和疫苗生產(chǎn)廠家用以應(yīng)對流行。但面對大流行的暴發(fā)，要在短時間內(nèi)提供足夠多的疫苗免疫易感人群，目前尚無法做到，這是全世界面臨的難題。

佐劑是一種抗原輔助劑，與疫苗共同使用可以明顯提高疫苗的免疫效果。由于流感疫苗的生產(chǎn)在時間上具有一定的后延性，當(dāng)流感大流行暴發(fā)時，要在短時間內(nèi)生產(chǎn)出能夠滿足大流行期間使用的疫苗是較為困難的。若輔以較好的佐劑，即可在增強(qiáng)流感疫苗免疫效果的同時，減少每劑流感疫苗的使用量，讓更多的易感人群能夠接種疫苗，達(dá)到迅速應(yīng)對大流行暴發(fā)的目的。常見的疫苗佐劑種類很多，目前已經(jīng)應(yīng)用于流感疫苗的佐劑有：鋁佐劑、MF59、LTK63等。鋁佐劑可以增強(qiáng)初次免疫，減少每次免疫抗原量和免疫次數(shù)，但是對于嗣后加強(qiáng)免疫效果較小，且可能發(fā)生多種不良反應(yīng)。其他流感疫苗佐劑的不良反應(yīng)較少，但對于疫苗免疫原性的增強(qiáng)作用較為有限。

在乳劑中，通常將粒徑小于100nm的乳劑稱為納米乳劑，納米乳劑是一種自發(fā)形成的，熱力學(xué)穩(wěn)定，外觀透明或近似透明的體系。納米乳劑通常由油相-水相-乳化劑-助乳化劑組成，連續(xù)相為水相、分散相為油相的納米乳劑為O/W型，連續(xù)相為油相、分散相為水相的納米乳劑為W/O型。納米乳劑具有粒徑小且均勻，易于制備，穩(wěn)定性、流動性均較好，易于注射等優(yōu)點(diǎn)，可作為藥物載體應(yīng)用于多種吸收方式的藥物制劑中，90年代后開始在世界上廣泛使用。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有疫苗佐劑存在的不良反應(yīng)以及疫苗免疫原性的增強(qiáng)作用較為有限等不足，本發(fā)明提供一種以納米乳劑為佐劑的流感病毒疫苗，可以極大增強(qiáng)疫苗免疫效果，降低不良反應(yīng)，減少每劑流感疫苗的使用量。

本發(fā)明的另一個目的在于提供一種制備以納米乳劑為佐劑的流感病毒疫苗的方法。

本發(fā)明提供的以納米乳劑為佐劑的流感病毒疫苗通過下列技術(shù)方案完成：它由下列質(zhì)量比的組分組成：

稀釋流感病毒疫苗????1～30％

油相????????????????1～50％

乳化劑??????????????20～70％

助乳化劑????????????20～70％。

所述稀釋流感病毒疫苗為將流感病毒疫苗原液或半成品或成品用注射用水稀釋到血凝素含量為15～180g/株.ml的流感病毒疫苗。

所述流感病毒疫苗原液是用世界衛(wèi)生組織(WHO)提供的毒種所制備的公知公用產(chǎn)品。

所述油相為常規(guī)的肉豆蔻酸異丙酯(IPM)或油酸乙酯(EO)或注射用大豆油中的一種。

所述乳化劑為常規(guī)的Tween80或聚氧乙烯蓖麻油(EL)中的一種，或者為質(zhì)量混合比為3∶2～2∶3的常規(guī)Tween80與Span80的混合物，或者為質(zhì)量混合比為1∶1的常規(guī)聚氧乙烯蓖麻油與Span80的混合物。

所述助乳化劑為常規(guī)的1，2-丙二醇或聚乙二醇400中的一種。

本發(fā)明提供的制備以納米乳劑為佐劑的流感病毒疫苗的方法，包括如下步驟：

A、用注射用水稀釋流感病毒疫苗至血凝素達(dá)15～180μg/株.ml，得稀釋流感病毒疫苗；

B、按下列質(zhì)量比備料：

稀釋流感病毒疫苗????1～30％

油相????????????????1～50％

乳化劑??????????????20～70％

助乳化劑????????????20～70％

C、將乳化劑、助乳化劑和油相混合后，在20～60℃溫度下，按50-500轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速，攪拌均勻，得混合溶液；