[發明專利]應用生物反應器制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法

無效

• 申請號: 201010102586.4
• 申請日: 2010-01-29
• 公開（公告）號: CN101804201A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發明（設計）人: 楊國松
• 申請（專利權）人: 福爾生物制藥股份有限公司
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;A61P31/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種應用生物反應器培養細胞，培養乙型腦炎病毒，經濃縮，滅活，純化方法高度純化乙型腦炎純化疫苗的方法。

2.根據權利要求1所述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，其所用的微載體可為濃度為10～30g/L球狀微載體，也可為濃度為10～60g/L片狀微載體。

3.根據權利要求1所述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，其病毒收獲期可達到5～15天，所收獲的病毒液為病毒收獲液。

4.根據權利要求3所述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，其病毒收獲液先經過30～100倍超濾濃縮后制備成病毒濃縮液，再加入滅活劑滅活后制備成滅活病毒濃縮液。

5.根據權利要求4所述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，其滅活病毒濃縮液，經加入終濃度可為大于2.0mg/ml至小于等于4.0mg/ml的硫酸魚精蛋白處理后10000g離心5min收集病毒上清液。

6.根據權利要求5述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，其病毒上清液，應用區帶轉頭，鋪設30％～36％和50％～60％兩個蔗糖密度梯度，28001～35000rpm區帶離心4～8h，經紫外檢測儀檢測280nm紫外吸收值，收集抗原蛋白峰。抗原蛋白峰位于40％～46％的蔗糖濃度范圍，且和雜蛋白峰分開良好。

7.根據權利要求6所述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，所收集的抗原蛋白峰的蔗糖溶液經超濾除糖后，配制成高純度的乙型腦炎純化疫苗。

8.根據權利要求1～7中任意一項所述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，制備的高純度的乙型腦炎純化疫苗，其宿主DNA殘留量達到不高于10pg/劑，總蛋白含量可達到0.5～3μg/劑，宿主蛋白含量可達到20～50ng/劑。

9.根據權利要求1～7中任意一項所述的制備高純度乙型腦炎純化疫苗的方法，在整個制備工藝中不添加任何的防腐劑，抗生素和佐劑。