[發(fā)明專利]一種利用腋芽增殖試管快繁地靈的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010100811.0
• 申請(qǐng)日: 2010-01-22
• 公開（公告）號(hào): CN101755682A
• 公開（公告）日: 2010-06-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳耀鋒;郭東偉;陳鑫;李春蓮;任慧莉;白延紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 西安恒泰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 61216
• 代理人: 李鄭建

1.一種利用腋芽增殖試管快繁地靈的方法，其特征在于，包括下列步 驟：

1)休眠芽發(fā)育誘導(dǎo)培養(yǎng)：在地靈收獲期，選取大田栽培、生長(zhǎng)健壯、 單株產(chǎn)量高的地靈單株的地下根莖，經(jīng)充分水洗后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75％的乙醇 消毒30秒，用每升含有0.1％的汞消毒10分鐘，于無(wú)菌條件下切成帶休眠 芽的莖段，接種到地靈休眠芽發(fā)育誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，于25℃～27℃溫度、 3000Lx光照條件下誘導(dǎo)地靈地下根莖休眠芽發(fā)育；

所述的地靈休眠芽發(fā)育誘導(dǎo)培養(yǎng)基以通用培養(yǎng)基MS為基礎(chǔ)，附加2.0 mg/L的6-呋喃基氨基嘌呤；

調(diào)整休眠芽發(fā)育誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為5.6，置壓力為1.0kg/cm²的高 壓滅菌鍋滅菌15分鐘；

2)腋芽增殖培養(yǎng)：當(dāng)休眠芽發(fā)育誘導(dǎo)培養(yǎng)基上的地靈根莖休眠芽發(fā)育 到3～4片葉時(shí)，切下幼苗接種到地靈腋芽發(fā)育增殖培養(yǎng)基中，于溫度25℃～ 27℃、3000Lx光照條件下誘導(dǎo)地靈無(wú)菌苗腋芽發(fā)育增殖；

所述的腋芽增殖培養(yǎng)基以通用培養(yǎng)基MS為基礎(chǔ)，附加2.0mg/L的6- 呋喃基氨基嘌呤(KT)和0.5mg/L的吲哚乙酸(IAA)；

調(diào)整腋芽增殖培養(yǎng)基的pH值為5.6，置壓力為1.0kg/cm²的高壓滅菌 鍋滅菌15分鐘；無(wú)菌苗經(jīng)過腋芽增殖培養(yǎng)，一個(gè)無(wú)菌苗增殖到4～5個(gè)苗或 枝條；

3)芽苗再增殖：切取腋芽增殖培養(yǎng)基上的單個(gè)枝條，接種到同一腋芽 增殖培養(yǎng)基上，在同樣培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)腋芽發(fā)育再增殖；

腋芽發(fā)育增殖進(jìn)行多次，每次為一代，根據(jù)增殖起始苗數(shù)、有效繁殖系 數(shù)和年生產(chǎn)規(guī)模確定增殖代數(shù)；

4)壯苗生根培養(yǎng)：地靈腋芽發(fā)育增殖每一代的試管苗和增殖培養(yǎng)結(jié)束 后所有試管苗，切下單個(gè)芽苗轉(zhuǎn)入壯苗生根培養(yǎng)基中，于25℃條件下連續(xù) 光照培養(yǎng)18天進(jìn)行壯苗生根；

壯苗生根培養(yǎng)基以通用培養(yǎng)基MS為基礎(chǔ)，將MS通用培養(yǎng)基的無(wú)機(jī)鹽濃 度降低一半，并附加0.5mg/L的α-萘乙酸(NAA)；

調(diào)整壯苗生根培養(yǎng)基的pH值為5.6，置壓力為1.0kg/cm²的高壓滅菌 鍋滅菌15分鐘；

5)煉苗和緩苗：試管苗生根壯苗培養(yǎng)18天后，向培養(yǎng)瓶中加少量無(wú)菌 自來(lái)水，于10～18℃遮陰條件下煉苗3～6天，然后取出試管苗，洗凈根部 瓊脂，移栽于含30％沙子的沙質(zhì)土壤營(yíng)養(yǎng)缽中，置于10～18℃遮陰條件下緩 苗10～15天；

6)起窩和栽種：地靈大田定植每畝按3000～5000株起窩，每窩澆足水， 將去掉營(yíng)養(yǎng)缽的地靈苗連同介質(zhì)直接栽入并覆土、澆水；

7)地靈大田定植緩苗后，按常規(guī)方法管理。