[發明專利]一種電化學發光檢測三聚氰胺的方法

有效

• 申請號: 201010100622.3
• 申請日: 2010-01-22
• 公開（公告）號: CN101750410A
• 公開（公告）日: 2010-06-23
• 發明（設計）人: 劉鳳玉;孫世國;楊雪
• 申請（專利權）人: 大連理工大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;C09K11/06
• 代理公司: 大連八方知識產權代理有限公司 21226
• 代理人: 高杰

技術領域

本發明屬于一種高靈敏電化學發光檢測領域，具體涉及一種電化學發光檢測三聚氰胺的 方法。

背景技術

三聚氰胺(英文名：Melamine)，簡稱三胺，俗稱蜜胺、蛋白精，又叫2，4，6-三氨 基-1，3，5-三嗪、1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺、2，4，6-三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。它 是一種三嗪類含氮雜環有機化合物，重要的氮雜環有機化工原料，也是農藥滅蠅胺的代 謝產物，廣泛用于塑料、造紙、紡織、皮革、電氣、醫藥等行業，是重要的尿素后加工產品。 三聚氰胺屬非食品用化學物質，食品中嚴禁添加。2008年9月16日，國家質檢總局公布22 家奶粉廠家生產的69批產品檢出三聚氰胺。兩天后，全國液態奶檢查結果公布，包括蒙牛、 伊利、光明等名牌在內的液態奶檢出了三聚氰胺。隨后，中國產雀巢奶制品、樂天小熊餅、 亨氏米糊等產品在港澳檢出三聚氰胺，最終導致全世界五十多個國家禁止進口或回收中國制 造、含有三聚氰胺的食品，后果十分嚴重。因此，開發一種簡單、高效的三聚氰胺檢測方法 具有十分重要的意義。

現有三聚氰胺檢測方法主要有高效液相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法(王立媛，吳平谷， 沈向紅，張晶，中國衛生檢驗雜志，2009，19(3)，556-557；吳惠勤，黃芳，林曉珊，鄧欣，馬葉 芬，黃曉蘭，朱志鑫，羅輝泰，分析測試學報，2008，27(10)，1044-1048)、液相色譜-質譜/ 質譜法(江和源，袁新躍，張建勇，崔宏春，劉曉輝，堯渝，茶葉科學，2009，29(1)，15～19) 等，檢測定量限分別為2毫克/千克、0.05毫克/千克和0.01毫克/千克。這三種方法也是國標 頒布奶制品中三聚氰胺的檢測方法《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》(GB/T 22388-2008)。目前一份樣品三聚氰胺成份的檢測時間，通常需要至少三到四小時，最快的方 法也需要兩小時。并且最低檢測限不能滿足要求，檢測范圍不夠寬，檢測過程操作復雜，所 用儀器一般比較昂貴。

三聯吡啶釕Ru(bpy)₃²⁺電化學發光(Electrochemiluminescence，簡稱ECL)具有原 位響應、檢測靈敏度高、線性范圍寬和儀器簡單等優點，在藥物分析、氨基酸分析、 DNA探針分析、酶生物傳感器領域得到了廣泛應用。但目前還沒有任何將電化學發光 用于三聚氰胺檢測的相關報道。

發明內容

本發明的目的是針對現有的三聚氰胺檢測方法，提出一種全新的檢測限更低、檢測線性 范圍更寬、靈敏度更高的電化學發光檢測三聚氰胺的方法。

本發明的原理是：本發明使用聯吡啶釕/鋨類化合物作為發光物質，三聚氰胺作為共反應 物之一，同時也是被檢測物。將它們分別溶于磷酸或硼酸緩沖溶液中，用電化學方法在0-1.8 V電位范圍內對其進行掃描；同時利用光檢測器采集產生的光信號，經計算機數據處理得到 檢測結果。由于聯吡啶釕/鋨類化合物具有很高的發光效率，即使被測物三聚氰胺的濃度很低， 該方法仍可檢測到明顯電化學發光響應，并且三聚氰胺加入前后體系電化學發光強度的變化 與體系中三聚氰胺濃度的對數值呈現良好的線性關系，通過計算可以確定體系中三聚氰胺的 含量。

為達到上述目的，本發明的技術方案是：一種電化學發光檢測三聚氰胺的方法，步驟如 下：

(1)根據三聚氰胺樣品濃度，將10^-7～10^-1mol/L的聯吡啶釕/鋨以及待測的三聚氰胺樣 品分別加入到pH值為3-11的0.1M的磷酸鹽或硼酸鹽緩沖溶液中；

(2)在任意一款電化學工作站上，對步驟(1)配置的溶液進行掃描；掃描電位范圍0-1.8 V；

(3)用光檢測器采集電化學工作站掃描產生的光信號，再經計算機數據處理后得到三聚 氰胺樣品的含量。

該方法適用于檢測所有含有三聚氰胺的物質，檢測可使用任意一款電化學工作站和/或發 光檢測器。

所述的聯吡啶釕/鋨化合物具有下列結構通式：

M(L)₂L′

通式中：M為Ru或Os；L選自任意的2，2′-聯吡啶及其衍生物或者1，10-鄰菲咯啉 (二氮雜菲)及其衍生物，L′選自以下配體：