[發(fā)明專利]火把梨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因PpPGIP及應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010100333.3
• 申請日: 2010-01-22
• 公開（公告）號: CN101736015A
• 公開（公告）日: 2010-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉迪秋;李文嫻;王繼磊;葛鋒;方松剛;王光勇;田榮歡
• 申請（專利權(quán)）人: 昆明理工大學(xué)
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責(zé)任公司 53100
• 代理人: 金耀生

1.一種火把梨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因PpPGIP，其特征在于它具有序列表SEQID所述的堿基序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的火把梨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因PpPGIP，其特征在于PpPGIP基因長1032bp，其中990bp為開放閱讀框，編碼含330個氨基酸的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白質(zhì)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的火把梨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因PpPGIP，其特征在于編碼區(qū)是序列表第18-1007位所示的核苷酸序列，或是編碼蛋白質(zhì)與SEQID編碼蛋白質(zhì)相同的其它DNA序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的火把梨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因PpPGIP，其特征在于編碼蛋白PpPGIP分子量為36.5KDa，等電點(diǎn)6.64。

5.權(quán)利要求1所述的火把梨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因PpPGIP在植物抗真菌中的應(yīng)用，對黑曲霉、擬莖點(diǎn)霉屬真菌、交鏈孢菌、青霉菌多種真菌具有明顯的抑制作用，以提高植物的抗真菌活性。

6.權(quán)利要求5所述的火把梨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因PpPGIP在植物抗真菌中的應(yīng)用方法，其特征在于提高植物的真菌抗性具體操作如下：

(1)將基因PpPGIP與適宜的植物超表達(dá)載體pCAMBIA1301或pK2GW7或pCAMBIA2300s連接，構(gòu)建植物超表達(dá)載體；

(2)將上述構(gòu)建的重組載體通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)入目標(biāo)植物中；

(3)以重組載體T-DNA上具有的抗性標(biāo)記篩選轉(zhuǎn)化子，并通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)獲得真正的轉(zhuǎn)基因植株，接種特定真菌或是分析轉(zhuǎn)基因植物蛋白對真菌生長的抑制活性，最后篩選出對真菌抗性明顯增強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因植株。