[發明專利]西花薊馬特異性COI引物、檢測方法及試劑盒

無效

• 申請號: 201010100317.4
• 申請日: 2010-01-22
• 公開（公告）號: CN101818146A
• 公開（公告）日: 2010-09-01
• 發明（設計）人: 閔亮;張桂芬;孟祥欽;劉循;萬方浩;劉萬學;郭建英;周忠實;王文凱
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/12;C12Q1/68
• 代理公司: 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇;楊小蓉

技術領域

本發明涉及分子生物學領域，具體地，本發明涉及西花薊馬特異性COI引物、 檢測方法及試劑盒。

背景技術

西花薊馬Frankliniella?occidentalis(Pergande)屬纓翅目，鋸尾亞目，薊馬科， 花薊馬屬，是一種世界性檢疫害蟲，歐洲和地中海植物保護組織(EPPO)將其列為A2 檢疫性有害生物，對加勒比海區域植物保護委員會(CPPC)以及國際植物保護與動物 衛生組織(OIRSA)亦具有檢疫重要性。西花薊馬為多食性害蟲，寄主范圍非常廣泛， 目前已知的寄主植物有62科500多種，并且隨著研究的深入，新的寄主植物種類不 斷發現。西花薊馬的寄主植物包括各種重要的經濟作物、蔬菜、花卉以及雜草，不 僅可為害保護地蔬菜花卉，對大田作物、果樹、蔬菜以及棉花、煙草等亦可造成嚴 重損失。據報道，1998年西花薊馬在荷蘭造成的損失達3000萬美元，1999年在英 國僅對觀賞植物所造成的損失即有1800萬美元。除以成蟲產卵和成/幼蟲銼吸直接造 成為害以外，西花薊馬還可以以持久性的方式傳播多種植物病毒，其中最為重要的 是番茄斑萎病毒屬病毒(Tospoviruses)——番茄斑萎病毒(Tomato?spotted?wilt?virus， TSWV)和鳳仙花壞死斑病毒(Impatiens?necrotic?spot?virus，INSV)。而且其傳播病毒所 造成的損失遠遠大于直接取食，如1989年番茄斑萎病毒在夏威夷曾導致苜蓿減產 50～90％；1999年美國喬治亞州因為此病毒的為害使煙草減產30％以上，損失達28 億美元。

西花薊馬原產于北美洲，1955年首先在美國夏威夷考艾島發現，曾是美國加利 福尼亞洲最常見的一種薊馬。20世紀70年代以前西花薊馬只分布于北美洲西部，自 80年代初期以來迅速擴散至各大洲，目前已在69個國家和地區有報道，成為世界性 的重要害蟲之一。我國農業部于1996年將西花薊馬列為進境地植物檢疫潛在性害蟲。 之后，2000年在昆明國際花卉節上參展的緬甸盆景上曾發現西花薊馬，同年5月臺 灣在來自馬來西亞的切花上截獲西花薊馬，但此后再未發現其蹤跡。然而，2003年 在北京市郊某大棚的辣椒上發現了西花薊馬；隨后對北京地區西花薊馬的發生為害 情況進行了調查，發現其發生地已由2003年的2個點擴大為2005年的6個區，為 害的植物也從最初的辣椒到2005年的28科65種，受害嚴重的植物被銼食的葉片面 積超過50％，呈擴散蔓延趨勢。同時，云南省蒙自地區的調查表明，已約有90％的 辣椒受西花薊馬的為害；之后，2007年在山東青島也發現西花薊馬的發生。西花薊 馬是傳入我國的一種外來入侵生物，鑒于其目前僅在我國局部地區發現，而且已經 在國外一些地區造成了嚴重為害，在我國具有進一步擴散和蔓延的趨勢。并且事實 上，西花薊馬近些年在世界各地迅速蔓延，成為制約蔬菜花卉產業發展的主要因素。 而種苗、花卉及其它農產品尤其切花的運輸等人為因素是西花薊馬遠距離傳播擴散 的主要方式，因此需加強對西花薊馬的檢疫和監測，杜絕人為傳播。

西花薊馬體型微小，成蟲體長不足1.5mm，卵長0.2mm；而且，成蟲常將卵產 在寄主植物組織中，預蛹和蛹期則在土壤中度過。而加強檢疫和監測必需建立一套 快速而準確的分子檢測方法。目前國際上用于西花薊馬鑒定的方法主要有：1)形態特 征鑒定；2)PCR技術等，但目前國內針對西花薊馬尚沒有標準的檢測方法。