[發(fā)明專利]中間蒼白桿菌的脂多糖及其作為哺乳動物免疫刺激劑的用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980160301.8
• 申請日: 2009-12-31
• 公開（公告）號: CN102802639A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡安·伊格納西奧·奧韋赫羅吉薩索拉;曼努埃爾·弗雷斯諾埃斯庫德羅
• 申請（專利權(quán)）人: 奧韋赫羅實驗室公司
• 主分類號: A61K31/739
• 分類號: A61K31/739
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 顧晉偉;韓宏星

1.一種來自中間蒼白桿菌(Ochrobactrum?intermedium)LMG3306的脂多糖，其能在哺乳動物中激發(fā)免疫應(yīng)答，用于治療和/或預(yù)防敗血癥。

2.用于制備權(quán)利要求1的脂多糖的方法，其包括用胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)來自中間蒼白桿菌菌株LMG?3306的細菌

3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，還包括按以下步驟提取所述脂多糖：

a)將中間蒼白桿菌LMG3306的滅活培養(yǎng)物離心；

b)將所獲得的沉淀物重懸在鹽水懸浮液中；

c)用純水和聚乙二醇透析；

d)用四體積的甲醇和1％的醋酸鈉飽和甲醇沉淀；和

e)冷凍干燥以獲得粗制LPS。

4.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，還包括按以下步驟純化粗制LPS：

a)在緩沖液(10mM?Tris-HCI?pH?7.5)中溶解粗制LPS，任選地以超聲輔助；

b)添加蛋白酶K并在室溫下孵育；

c)通過超速離心收集純化的LPS；和

d)冷凍干燥該樣品。

5.一種免疫刺激劑組合物，其包含權(quán)利要求1的來自中間蒼白桿菌LMG3306的脂多糖和任選地一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其特征在于，其包含化學(xué)純的中間蒼白桿菌LMG?3306的LPS，其中非溶劑組分未被超過0.2％的其他化合物所污染。

7.根據(jù)權(quán)利要求5～6中任一項的組合物，其特征在于，其包含0.5～120μg/ml的來自中間蒼白桿菌菌株LMG3306的LPS。

8.根據(jù)權(quán)利要求5～7中任一項的組合物，其中所述脂多糖處于均勻的懸浮液中，其中膠束相在4℃下穩(wěn)定超過1年。

9.根據(jù)權(quán)利要求5～8中任一項的組合物，其中所述組合物的pH在2～12之間。

10.根據(jù)權(quán)利要求5～9中任一項的組合物在制備用于調(diào)節(jié)哺乳動物免疫應(yīng)答的藥物中的用途。

11.根據(jù)權(quán)利要求10的用途，其中所述調(diào)節(jié)包括在所述哺乳動物中增強免疫活性。

12.根據(jù)權(quán)利要求11的用途，其中所述免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)在于誘導(dǎo)巨噬細胞分化、產(chǎn)生TNF、產(chǎn)生IL-12、脾淋巴細胞產(chǎn)生IFN-γ和/或刺激病毒特異性的CD8和CD4T細胞。

13.根據(jù)權(quán)利要求11的用途，其中所述調(diào)節(jié)包括在所述對象中抑制促炎細胞因子的產(chǎn)生。

14.權(quán)利要求13的用途，其中所述促炎細胞因子為IL-12。

15.根據(jù)權(quán)利要求5～9中任一項的組合物作為疫苗佐劑用于改進對抗所述疫苗中所含有的特異性病毒和/或細菌之免疫的用途。

16.根據(jù)權(quán)利要求5～9中任一項的組合物在制備用于治療和/或預(yù)防敗血癥的藥物中的用途。

17.根據(jù)權(quán)利要求5～9中任一項的組合物在制備用于治療和/或預(yù)防內(nèi)毒素血癥的藥物中的用途。

18.根據(jù)權(quán)利要求5～9中任一項的組合物在制備用于治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的用途。

19.根據(jù)權(quán)利要求18的組合物在制備用于在免疫抑制的動物中治療和/或預(yù)防感染的藥物中的用途。

20.根據(jù)權(quán)利要求18～19中任一項的組合物作為用于對抗利什曼原蟲感染之疫苗佐劑的用途。

21.根據(jù)權(quán)利要求20的組合物作為用于對抗利什曼原蟲皮膚感染之疫苗佐劑的用途。