[發明專利]從植物細胞培養物中生產和抽提原花青素

無效

• 申請號: 200980159092.5
• 申請日: 2009-05-04
• 公開（公告）號: CN102414312A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發明（設計）人: M·文卡特拉莫斯;D·R·瓦格納;S·拉爾;F·勒雅爾;S-Y·尹
• 申請（專利權）人: 戴安娜植物科學有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

相關申請的交叉引用

本申請要求2009年4月3日提交的美國臨時申請號61/166,591的權益，該申請在此以其整體引入作為參考。

技術領域

本發明涉及用于發展可可組織細胞培養物的方法。本發明還涉及選擇生產高水平原花青素的細胞系及從細胞培養物中抽提同樣物質以生產食品配料、食品添加劑、治療組合物、或化妝品組合物的方法。本發明還涉及新培養基，如用于生長可可細胞的細胞懸浮培養物的液體培養基及用于提高此懸浮細胞的原花青素生產的液體培養基組合物。

背景技術

多酚廣泛分布于植物、水果和蔬菜中，并且因其在人類和動物健康中的生理功能(包括抗氧化、抗突變和預防癌癥的活性)受到了相當的重視(Salvia等，J.Agric.Food?Chem.39：1549-1552，1991；Bomser等，Cancer?Lett.，135：151-157，1999；Zhao等，Carcinogenesis，20：1737-1745，1999)。流行病學研究曾暗示了多酚中的黃酮類化合物可以降低心臟病的風險(Hertog等，Lancet：342：1007-1011，1993)。此外，已有結果顯示膳食黃烷-3-醇和/或原花青素在實驗動物中降低了動脈粥樣硬化和冠心病的發病率(Tijburg等，Atherosclorosis，135：37-47，1997；Yamakoshi等，Atherosclerosis，142：139-149，1999)。負責這些效果的機制之一涉及到它們對于低密度脂蛋白(LDL)氧化的抑制作用(Steinberg，Circulation，85：2337-2344，1992)。

已知可可植物(可可屬可可Theobroma?cacao?L.，梧桐科)的種子富含多酚(Porter等，Phytochemistry，30：1657-1663，1991)。制備自發酵和烘烤可可豆的可可酒的某些抗氧化組分(可可和巧克力產品的主要成分)已被鑒定為黃烷-3-醇和原花青素寡聚體(Sanbongi等，J.Agric.Food?Chem.，46：454-457，1998；Adamson?等，J.Agric.Food?Chem.，47：4184-4188，1999)。

可可屬的其他種和如Herrania的其他屬也是可可原花青素的已知的來源。可可屬的二十個不同種已有所描述，但通常只有十二種被接受。在這些種中，九個原產于亞馬遜河流域，因此遺傳分布的中心似乎是該區域的西半部(Giacometti，1994，In“Neglected?Crops：1492?from?a?different?perspective(J.E.Hemando?Bermejo和J.Leon，編)Plant?Production?and?Protection?Series?No.26，FAO，Rome，Italy，p205-209)。

可可屬一般在新熱帶區，并且分布在北緯18°和南緯15°之間的西半球的熱帶雨林中。具有最多物種的區域是在哥斯達黎加和東北哥倫比亞之間。人們發現了五派和二十個種。大花可可樹(Theobroma?grandiflorum)屬于由十一個種組成的Glossopetalum(Glossopetalum)派；可可屬可可是可可派的唯一種。

可可屬的四個種已被描述為可食用肉的生產者：大花可可樹、Theobroma?canumanense?Pires?&?Froes、Theobroma?subincanum?Martius、(巴西的Cupuí及哥倫比亞的Cacau?de?monte)和Theobroma?tricolor?Humb.&?Bonpl，是自西亞馬遜河流域至南墨西哥都有分布的小樹。巧克力也由這些種的種子制造(Giacometti，1994，In“Neglected?Crops：1492?from?a?different?perspective(J.E.Hemando?Bermejo和J.Leon，編)Plant?Production?and?Protection?Series?No.26，FAO，Rome，Italy，p205-209)。已有結果顯示可可屬與Herrania屬的幾個種的豆生產類似的原花青素，并且這些化合物能從豆中抽提(Romanczyk等，WO?97/36497)。