[發明專利]對抗抗淀粉樣β肽的抗體的抗獨特型抗體

在審

• 申請號: 200980151715.4
• 申請日: 2009-12-18
• 公開（公告）號: CN102257010A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: U·埃西希;W·赫斯爾;K-G·施圖本拉赫;R·福格爾
• 申請（專利權）人: 弗·哈夫曼-拉羅切有限公司
• 主分類號: C07K16/42
• 分類號: C07K16/42
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 陳迎春;黃革生

本發明涉及結合抗-Aβ抗體的抗獨特型抗體和用于檢測抗體結合抗-Aβ抗體上的相同或重疊表位的試驗。

發明背景

大約所有癡呆病例中的70％是由于阿爾茨海默氏病引起的，該疾病與對于認知重要的大腦區域和神經回路的選擇性損傷相關。阿爾茨海默氏病的特征在于神經纖維纏結(特別是在海馬的椎體神經元中)和大量主要含有淀粉樣沉積物的致密核心和淡染(defused)暈圈的淀粉樣斑塊。

胞外神經斑塊含有大量稱為“淀粉樣β”、“A-β”、“Aβ4”、“β-A4”或“Aβ”的主要的纖維肽(參見，例如，Selkoe，D.J.，Ann.Rev.Cell?Biol.10(1994)373-403；Koo，E.H.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA?96(1999)9989-9990；US?4,666,829；或Glenner，G.G.，Biochem.Biophysic.Res.Commun.122(1984)1131-1135)。這種淀粉樣β肽源自“阿爾茨海默前體蛋白/β-淀粉樣前體蛋白”(APP)。APP是完整膜糖蛋白(參見，例如，Sisodia，S.S.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA?89(1992)6075-6079)，并且通過質膜蛋白酶，α-分泌酶在Aβ序列內通過內部蛋白質水解分裂(參見，例如，Sisodia(1992)，loc.cit.)。此外，更多的分泌酶活性，特別是β-分泌酶和γ-分泌酶活性，導致包含39個氨基酸(Aβ39)、40個氨基酸(Aβ40)、42個氨基酸(Aβ42)或43個氨基酸(Aβ43)的淀粉樣-β(Aβ)的胞外釋放(參見，例如，Sinha，S.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA?96(1999)11049-11053；Price，D.L.，Science?282(1998)1079-1083；WO?00/72880；或Hardy，J.，Trends?in?Neuroscience(1997)154-159)。

值得注意的是Aβ具有幾種天然產生的形式，由此將人的形式稱為以上提及的Aβ39、Aβ40、Aβ41、Aβ42和Aβ43。最重要的形式Aβ42具有氨基酸序列(從N-端開始)：DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA(SEQ?ID?NO：13)。在Aβ41、Aβ40、Aβ39中，各自缺失了C-端A、IA和VIA。在Aβ43-形式中，在上述序列的C-端包含另外的蘇氨酸殘基。

使用抗體的標準固相免疫試驗涉及吸附/固定于固相上的抗體(捕獲抗體)、抗原和用酶或檢測標記偶聯的抗原的另一個表位的抗體(示蹤抗體)之間的復合物的形成。在該試驗中，形成了多層結構：固相/捕獲抗體/抗原/示蹤抗體。在通過多層結構催化的反應中，其中抗體-偶聯酶的活性與孵育培養基中的抗原濃度成比例。標準多層結構方法也稱為雙抗原橋接免疫試驗，因為捕獲抗體和示蹤抗體結合相同抗原上的不同表位。Hoesel，W.等(J.Immunol.Methods?294(2004)101-110)報道了抗-EPO雙抗原橋接試驗，其中使用了與氨基和碳水化合物基團偶聯的固定化rhEPO的混合物。如雙抗原橋接ELISA這樣的免疫試驗是病人對藥物抗體的致免疫答案研究的常用試驗類型。Mire-Sluis，A.R.等(J.Immunol.Methods?289(2004)1-16)總結了使用對抗生物技術產物的宿主抗體的檢測來設計和優化免疫試驗的建議。例如，在WO2005/045058和WO90/006515中提及了抗藥物抗體試驗。例如，在US5,219,730；WO87/002778；EP0139389和EP0170302中提及了抗獨特型抗體試驗。Wadhwa，M.等(J.Immunol.Methods?278(2003)1-17)報道了用于檢測、測量和表征由治療性生物制品誘導的不需要的抗體的策略。在US2007/0093415中，報道了淀粉樣特異性肽及其用途。在EP1917854中，報道了產生抗獨特型抗體的方法。

發明概述

本發明的第一個方面是結合對抗淀粉樣β肽的抗體的抗獨特型抗體及其在根據本發明的試驗中的用途。在一個實施方案中，所述抗體的特征在于結合與獲自保藏的細胞系DSM?ACC2939的抗體相同或重疊的表位。另一個實施方案是所述抗體是獲自保藏的細胞系DSM?ACC2939的抗體。