[發(fā)明專利]用包含帶電荷的季氨基的聚合物的核酸載體的修飾

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980149460.8
• 申請日: 2009-12-11
• 公開（公告）號: CN102245213A
• 公開（公告）日: 2011-11-16
• 發(fā)明（設計）人: L·W·西摩;K·費希爾;K·烏爾布里希;V·舒布爾
• 申請（專利權）人: 普西奧庫斯治療有限公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K35/76
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 羅菊華

【技術領域】

本發(fā)明涉及修飾優(yōu)選用于遞送治療性轉基因或活性的粒子載體(包括病毒、病毒片段及自組裝合成的載體)的生物學和/或物理-化學性質的改良的方法。本發(fā)明也涉及已根據(jù)本發(fā)明修飾造成它們的生物學和/或物理-化學性質修飾或變化的核酸載體、它們的制備方法及它們在各領域(包括醫(yī)學)中的各生物技術策略中的用途。

【背景技術】

微生物，包括病毒，在貫穿生物技術的廣領域有許多應用。它們涉及醫(yī)學、農業(yè)、工業(yè)生產(chǎn)工藝(顯然包括油及釀造工業(yè))及生物除污。已鑒定了許多有用的應用及功能，及開發(fā)用于所述生物學試劑。但是，常它們的活性的發(fā)展或增強被它們的精細的性質限制，限制它們實現(xiàn)理論上可能的但實際上超過它們的范圍的任務的能力。在此情況下，這相當常遇到，將常期望再改造病毒或微生物的性質以賦予其就其所需的目的更適當?shù)男再|。

由此、生物學殺昆蟲劑(例如桿狀病毒)的有用性可受不適當?shù)陌刑禺愋约安焕脑诃h(huán)境中的存活特征所限；硫代謝細菌可在石油化學工業(yè)被不充分的發(fā)散及分布模式而有用的應用受限；及在人或獸醫(yī)學基因治療中，期望介導治療性基因的遞送的病毒的有用性可被在靶組織中轉基因表達的無效受限。

體細胞基因治療領域在近年因為其改善許多不同的類型的疾病的治療的有效性而受到關注，所述疾病包括：遺傳疾病(例如囊性纖維化、肌肉營養(yǎng)不良、酶缺陷)及由年齡相關的或損傷相關的生理劣化所致的疾病(癌，心臟病，成年型糖尿病)。但是，盡管該領域快速及廣泛發(fā)展，包括超過100例臨床試驗的起始，對患者的清楚的治療性益處的例子非常少。一項反義技術最近被許可給人使用，但尚無基因治療策略仍滿足它們的原許諾，及在可預見的將來在常規(guī)臨床應用中無可能獲得批準。

也可將病毒用作疫苗抗原的有效遞送載體，例如通過編碼重組腺病毒‘載體’之內的瘧疾或流感蛋白。此類型的疫苗在實驗室研究中顯示針對廣范圍的重要的病原體的用途的巨大潛力。

相關的技術領域已知為‘病毒治療’，其中裂解病毒(其可或不可加工為載荷治療性基因)能在癌細胞之內選擇性地復制，導致腫瘤之內的病毒擴增，腫瘤細胞的裂解及感染擴展到裂解復制循環(huán)重復的相鄰腫瘤細胞中。

缺失治療性功效的原因部分反映患者群(被募集參加這些實驗治療的多數(shù)患者已患病頗重，從而甚至有效治療可顯示少的治療性益處)，但主要反映達到的治療性基因表達的不充分的水平、持續(xù)時間及分布。主要問題是，人受試者具有對病毒載體的先前既有的免疫(不像保持在無病原體環(huán)境中的實驗動物)。如果提供有先先前既有的對治療性病毒載體的免疫的實驗動物，它們未如它們在人中一樣在動物中顯示功效。甚至當可通過使用之前未暴露人群的病毒載體(及因此不前-免疫)避免人中先前既有的免疫時，仍有問題。首次施用新病毒載體之后，我們的免疫系統(tǒng)將產(chǎn)生對其的應答，防止該載體隨后使用。這對于試劑的多次使用是必需的多數(shù)應用是尤其重要的。例如通常要求用第二或第三施用加強疫苗。簡言之，復雜的治療策略的成功的應用被不充分的用于基因遞送及表達的載體限制。

迄今探究的用于基因治療應用的2種主要類型的載體是：非-病毒(通常基于陽離子脂質體)載體及病毒(通常反轉錄病毒、腺病毒、后來是腺伴隨病毒(aav)及慢病毒)載體。

開發(fā)用于病毒治療的裂解病毒包括腺病毒(全部血清型)、皰疹病毒、披膜病毒(有名的是α病毒例如辛德畢斯及西門利克森林病毒)、心臟病毒(有名的是Seneca?Valley病毒)、痘苗病毒、肺泡口炎病毒、新城疫病毒、麻疹病毒及呼腸孤病毒。

病毒是作為用于基因遞送的載體的明顯的選擇，由于這基本上是它們在自然中的唯一功能。隨后病毒至今在基因治療中顯著使用，形成大部分載體用于臨床研究。腺病毒的限制它們的成功的應用的主要特征是它們的免疫原性。盡管它們是專業(yè)病原體，進化了百萬年成為高度有效基因遞送載體，它們的宿主類似地發(fā)展了非常有效的保護機理。來自癌患者的血清及腹水流體含甚至以高稀釋度可完全阻止病毒體外感染的抗體。

涉及腺病毒的典型的人流程導致顯著的炎癥應答、以及無效的靶細胞感染。

盡管非-病毒系統(tǒng)具有得多更佳安全性記錄，及更容易大量產(chǎn)生，它們具有低特異性轉染活性。靶組織中的基因表達效率也是與非-病毒系統(tǒng)相關的主要問題。