[發明專利]用于蛋白生產: CA2+ ATP酶過表達的改良的載體和酵母菌株

無效

• 申請號: 200980140300.7
• 申請日: 2009-08-10
• 公開（公告）號: CN102177247A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 崔秉權
• 申請（專利權）人: 格利科菲公司
• 主分類號: C12P21/00
• 分類號: C12P21/00;C12N5/10;C12N15/81
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李波;劉健

1.一種低等真核生物宿主細胞，其包含編碼至少一種內源或外源Ca^2+?ATP酶的核酸分子，其中Ca^2+?ATP酶在所述宿主細胞中的表達是異位的。

2.權利要求1的低等真核生物宿主細胞，其中所述核酸分子包含可操作地連接到異源啟動子上的編碼Ca^2+?ATP酶的開放讀碼框。

3.權利要求1的低等真核生物宿主細胞，其中所述宿主細胞另外包括編碼重組蛋白的核酸分子。

4.權利要求3的低等真核生物宿主細胞，其中所述重組蛋白是抗體。

5.權利要求1的低等真核生物宿主細胞，其中編碼分子伴侶蛋白的至少一個內源基因的功能已經被減少、破壞或刪除；并在所述宿主細胞中表達編碼所述分子伴侶蛋白的至少一種哺乳動物同系物的核酸分子。

6.權利要求1的低等真核生物宿主細胞，其中所述宿主細胞另外包括編碼ERp57蛋白的核酸分子和/或編碼鈣網蛋白的核酸分子。

7.一種生產具有減少的O-糖基化的重組蛋白的方法，所述方法包括：

(a)?提供低等真核生物宿主，其包含編碼至少一種內源或外源Ca^2+?ATP酶的核酸分子，其中所述Ca^2+?ATP酶在所述宿主細胞中的表達是異位的；

(b)?將核酸分子導入編碼所述重組蛋白的宿主細胞中；和

(c)?在適合生產所述重組蛋白的條件下，培養所述宿主細胞。

8.權利要求7的方法，其中所述核酸分子包含可操作地連接到異源啟動子上的編碼Ca^2+?ATP酶的開放讀碼框。

9.權利要求8的方法，其中所述重組蛋白是抗體。

10.權利要求7的方法，其中編碼分子伴侶蛋白的至少一個內源基因的功能已經被減少、破壞或刪除；并在所述宿主細胞中表達編碼所述分子伴侶蛋白的至少一種哺乳動物同系物的核酸分子。

11.權利要求7的方法，其中所述宿主細胞另外包括編碼ERp57蛋白的核酸分子和編碼鈣網蛋白的核酸分子。

12.一種低等真核生物宿主細胞，其包含編碼ERp57蛋白的核酸分子和/或編碼鈣網蛋白的核酸分子，其中所述蛋白在所述宿主細胞中的表達是異位的。

13.權利要求12的低等真核生物宿主細胞，其中所述宿主細胞另外包括編碼至少一種內源或外源Ca^2+?ATP酶的核酸分子，其中Ca^2+?ATP酶在所述宿主細胞中的表達是異位的。

14.權利要求12的低等真核生物宿主細胞，其中所述宿主細胞另外包括編碼重組蛋白的核酸分子。

15.權利要求14的低等真核生物宿主細胞，其中所述重組蛋白是抗體。

16.權利要求12的低等真核生物宿主細胞，其中編碼分子伴侶蛋白的至少一個內源基因的功能已經被減少、破壞或刪除；并在所述宿主細胞中表達編碼所述分子伴侶蛋白的至少一種哺乳動物同系物的核酸分子。

17.一種生產具有減少的O-糖基化的重組蛋白的方法，所述方法包括：

(a)提供低等真核生物宿主，其包含編碼ERp57蛋白的核酸分子和/或編碼鈣網蛋白的核酸分子，其中所述蛋白在宿主細胞中的表達是異位的；

(b)?將核酸分子導入編碼所述重組蛋白的宿主細胞中；和

(c)?在適合生產所述重組蛋白的條件下，培養所述宿主細胞。

18.權利要求17的方法，其中所述宿主細胞另外包括編碼至少一種內源或外源Ca^2+?ATP酶的核酸分子，其中所述Ca^2+?ATP酶在所述宿主細胞中的表達是異位的。

19.權利要求17的方法，其中所述重組蛋白是抗體。

20.權利要求17的方法，其中編碼分子伴侶蛋白的至少一個內源基因的功能已經被減少、破壞或刪除；并在所述宿主細胞中表達編碼所述分子伴侶蛋白的至少一種哺乳動物同系物的核酸分子。