[發明專利]用于確定分析物比的校準表面方法

有效

• 申請號: 200980138015.1
• 申請日: 2009-08-13
• 公開（公告）號: CN102159947A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: R·利庫斯基;R·沃克;呂亞兵
• 申請（專利權）人: 生物輻射實驗室股份有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/533
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 李玲

相關申請的交叉引用

本申請是2008年8月21日提交的美國非臨時申請No.12/196,132(律師卷號：02558B-082500US)的繼續申請且要求其優先權，其全部內容通過引用通用地結合于此。

發明背景

1.技術領域

本發明一般地涉及用于測量樣本中的分析物比的方法。該方法一般地應用于其結果表示為比的任何一對分析物。另外，多個比可表示為多對分析物比。

背景技術

計算樣本中的兩個或以上分析物之比在各種背景中是有用的比較。比經常用于補償樣本中分析物的組分或濃度的可變性。舉例而言，當測量存在于尿液中的分析物時，任何給定樣本中的分析物濃度可顯著變化。這些濃度變化可通過創建存在于樣本中的不同分析物之間的比來歸一化。舉例而言，可在尿液分析物濃度和尿液中的肌氨酸酐濃度之間創建比。在樣本中的兩個分析物之間創建該比允許根據濃度波動的更有意義的測量。還有可能將組織中的期望分析物濃度針對總蛋白或者例如清蛋白的特定蛋白濃度而歸一化。比還可補償測量中的相關錯誤，例如稀釋誤差。

在圖1中示出用于計算分析物濃度比的最常規現有方法的簡述。

在步驟101，從患者取試樣。示例試樣包括血液、尿液、或者其它體液。該試樣形成樣本的基礎，將根據其測量并計算分析物比。試樣不一定直接來自患者。可從其它源獲得試樣。

在步驟102，試樣轉換為經預處理的樣本。經預處理的樣本還可稱作化驗樣本。該步驟可由在執行任何分析物測量之前對試樣進行的任何動作組成。舉例而言，在某些實施例中，可對試樣進行取樣并以特定量稀釋。在其它實施例中，可向試樣添加抗凝劑。該步驟是可選的，因為可能有時整個未改變的試樣將用作經預處理的樣本。

在步驟103和104測量該樣本。在這兩個步驟中，樣本中的感興趣的量表示為響應量。步驟103包含所有由儀器所作的以使預處理的樣本準備好被讀取的處理。處理樣本可包含各種步驟。將多分析物夾層免疫測定作為示例，該樣本與連接到固相的抗體或特定接合試劑反應，清洗固相以移除與一個或多個標記的抗體或接合試劑起反應的未接合材料，并清洗以移除未接合標記試劑以用于響應量的后繼讀取。其它示例包括高性能液相層析法(HPLC)、免疫測定法、電泳法、毛細管電泳法、紫外/可視/紅外光譜法、拉曼光譜法、表面增強拉曼光譜法、質譜法、氣相層析法、或其他。可存在無需對樣本采取處理步驟的實例。

在步驟104中，所選讀取技術用于確定樣本中各分析物響應量，其將用于比。步驟104稱作讀取分析物(響應量)。可能適當的讀取技術包括：熒光、吸光率、反射率、離子流、電化學電位、光密度、色彩、表面等離振子共振、或其它。通常基于要測量的樣本和分析物特性來選擇處理和讀取技術。使用所選測量方法測量的分析物響應量可以是適合于所選方法的任何單位。這些單位可以是熒光單位、光密度、色彩、離子流、化合光單位、電信號或其它。分析物還可按照多路復用方式測量，其中許多分析物在單個通道中測量，或者它們在多個但分開的個別化驗中測量。

分析物響應量之后轉換為其相應濃度。該步驟在步驟105和106中示出。典型地該轉換使用諸如校準曲線的裝置來實現。

在計算分析物濃度比之前，各分析物響應量必需分別轉換為濃度值。分析物濃度值不僅取決于測量的給定分析物響應量，還取決于樣本中的其它分析物響應量，這是因為分析物之間存在諸如交叉反應的交叉作用。使用所選測量技術來測量的樣本中分析物響應量和同一樣本中分析物濃度之間的關系通常是非線性的。因為該非線性關系，分析物響應量比與分析物濃度比可大有不同。因此，如果要計算分析物濃度比，必需在計算該比之前分別計算各分析物濃度。

校準曲線通常用于將分析物響應量轉換為濃度值。可通過選擇曲線模型然后確定模型系數值來創建分析物校準曲線，其中確定模型系數值是通過從其中分析物濃度在進行任何測量之前就是已知的一組樣本中測量分析物響應量來實現的。從這些已知樣本獲得的分析物響應量可作圖以產生校準曲線，然后該校準曲線用于推斷未知濃度的樣本中的分析物濃度如何。針對要轉換為濃度值的各分析物響應量創建分別的校準曲線。實際上，具有確定系數值的模型方程可直接用于確定濃度而不用作圖。參照校準曲線通常被采用，因為這比參照校準方程更直觀。

在步驟107，使用校準曲線計算的各濃度用于確定期望的分析物比。這可通過諸如除法的簡單數學運算來實現。分析物比通常是沒有單位的。