[發明專利]用于改良的治療特征的抗體的結構變體

有效

• 申請號: 200980136900.6
• 申請日: 2009-07-21
• 公開（公告）號: CN102159243A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: D·M·戈登伯格;C-H·張;H·J·漢森
• 申請（專利權）人: 免疫醫療公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;C07K16/18
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍;郭文潔

1.改良嵌合的、人源化的或人抗-CD20抗體或其抗原結合片段的方法，所述方法包括：在嵌合的、人源化的或人抗-CD20抗體或其抗原結合片段的重鏈的第三個互補性決定區(CDR)序列中，產生至少一個氨基酸置換，以制備置換的抗體或其抗原結合片段，其中所述置換的抗體或其抗原結合片段具有至少一種選自下述的改良特性：更慢的離開速率、更慢的抗原解離速率、更高的CDC活性、更高的ADCC活性、更高的細胞凋亡活性、在沒有交聯存在下更大的在體外誘導細胞死亡的能力、和當給受試者施用CD20-陽性的細胞時更大的在體內殺死或抑制CD20-陽性細胞的生長的能力。

2.權利要求1的方法，其中所述CD20-陽性的細胞是B-細胞。

3.權利要求1的方法，其中所述置換是在抗體的重鏈CDR3?(CDRH3)的Kabat位置101。

4.權利要求3的方法，其中所述置換包括：用天冬氨酸殘基替換在Kabat位置101處的天冬酰胺殘基。

5.權利要求4的方法，其中所述置換的抗體包含在Kabat位置94處的精氨酸殘基，且在Kabat位置101處的天冬氨酸殘基與在Kabat位置94處的精氨酸殘基形成離子鍵。

6.權利要求1的方法，其中所述置換的抗體或其片段抑制利妥昔單抗的結合CD20。

7.權利要求1的方法，其中所述置換的抗體是veltuzumab。

8.權利要求4的方法，其中天冬氨酸置換在Kabat位置101處的天冬酰胺導致抗-CD20抗體離開CD20的解離速率減慢至至多1/2。

9.權利要求1的方法，其中未置換的抗體的CDR序列與鼠抗-CD20抗體的CDR序列相同。

10.權利要求9的方法，其中所述鼠抗-CD20抗體包含輕鏈CDR序列????????????????????????????????????????????????、和重鏈CDR序列。

11.權利要求4的方法，其中所述置換的抗-CD20抗體或其片段包含輕鏈CDR序列、和重鏈CDR序列?。

12.權利要求1的方法，其中所述人源化的抗-CD20抗體包含人源化的抗-CD22抗體依帕珠單抗的框架區序列、或人源化的抗-CD20抗體veltuzumab的框架區序列。

13.權利要求4的方法，其中天冬氨酸置換在Kabat位置101處的天冬酰胺殘基導致暴露于所述抗體的Daudi細胞的補體-依賴性的細胞毒性增加。

14.權利要求4的方法，其中天冬氨酸置換在Kabat位置101處的天冬酰胺殘基導致暴露于所述抗體的Daudi細胞的補體-依賴性的細胞毒性的EC₅₀降低了30-40%。

15.治療受試者的疾病的方法，所述方法包括：

a)?得到通過權利要求2的方法制備的置換的嵌合的、人源化的或人抗-CD20抗體或其抗原結合片段；

b)?將所述置換的抗-CD20抗體或其片段施用給受試者；和

c)?治療受試者的疾病，其中所述疾病選自：B-細胞介導的免疫病、自身免疫病、B-細胞淋巴瘤和白血病、移植物抗宿主病、器官移植排斥、免疫性溶血性貧血、同種致敏和冷球蛋白血癥。

16.權利要求15的方法，其中所述疾病是免疫性血小板減少性紫癜、系統性紅斑狼瘡、干燥綜合征、伊文思綜合征、關節炎、動脈炎、尋常天皰瘡、腎移植排斥、心臟移植排斥、類風濕性關節炎、伯基特淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、濾泡淋巴瘤、小淋巴細胞淋巴瘤、彌散性B-細胞淋巴瘤、邊緣區淋巴瘤、慢性淋巴細胞白血病、急性淋巴細胞白血病和多發性骨髓瘤。

17.權利要求15的方法，其中所述置換的抗體或其片段是裸抗體或其片段。

18.權利要求15的方法，另外包括：在施用所述置換的抗體或其片段之前、同時或之后，給所述受試者施用至少一種治療劑。

19.權利要求15的方法，其中所述抗體或其片段綴合在至少一種治療劑上。