[發明專利]由來自植物的原料生產乳酸的方法及生產乳酸的細菌

有效

• 申請號: 200980135975.2
• 申請日: 2009-09-11
• 公開（公告）號: CN102333859A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 森重敬;高橋克幸;高橋均;和田光史;望月大資;宮澤大輔;安樂城正
• 申請（專利權）人: 三井化學株式會社
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/09;C12P7/56
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 楊宏軍

1.一種生產乳酸的大腸桿菌，具有蔗糖非PTS基因組中至少包括蔗糖水解酶基因的1種以上的基因，但是不包括阻抑蛋白(cscR)、蔗糖水解酶(cscA)、果糖激酶(cscK)及蔗糖透過酶(cscB)的組合和蔗糖水解酶(cscA)、果糖激酶(cscK)及蔗糖透過酶(cscB)的組合，并且具有利用基因重組的乳酸生產增強系統。

2.如權利要求1所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中所述蔗糖非PTS基因組中只具有蔗糖水解酶基因，并且具有利用基因重組的乳酸生產增強系統。

3.如權利要求1所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述生產乳酸的大腸桿菌進一步具有提高果糖代謝能力的系統。

4.如權利要求1所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述乳酸生產增強系統包括丙酮酸甲酸裂解酶活性的失活或降低。

5.如權利要求1所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述乳酸生產增強系統包括用于生成D-乳酸或L-乳酸的NADH依賴性乳酸脫氫酶活性的增強。

6.如權利要求1所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述乳酸生產增強系統包括：

D-乳酸脫氫酶活性的增強，和

所述大腸桿菌本身具有的FAD依賴性D-乳酸脫氫酶活性的失活或減低。

7.如權利要求1所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述乳酸生產增強系統包括：

L-乳酸脫氫酶活性的增強，

該大腸桿菌本身具有的D-乳酸脫氫酶活性及FMN依賴性L-乳酸脫氫酶活性中的至少任一方的失活或降低。

8.如權利要求3所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述增強果糖代謝能力的系統是在果糖代謝途徑中磷酸化能力的增強或果糖吸收能力的增強。

9.如權利要求8所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述果糖代謝途徑中磷酸化能力的增強來自果糖-1-磷酸激酶活性。

10.如權利要求8所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述果糖代謝途徑中果糖吸收能力的增強來自該大腸桿菌本身具有的FruR活性的失活或降低。

11.如權利要求1～10中任一項所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述蔗糖水解酶基因來自埃希氏菌屬細菌。

12.如權利要求1～10中任一項所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述蔗糖水解酶基因來自大腸桿菌O?157細菌。

13.如權利要求9所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述果糖-1-磷酸激酶來自埃希氏菌屬細菌。

14.如權利要求9所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，所述果糖-1-磷酸激酶是來自大腸桿菌MG?1655的蛋白質。

15.如權利要求1所述的生產乳酸的大腸桿菌，其中，生產乳酸的大腸桿菌是大腸桿菌K12衍生株。

16.一種生產乳酸的方法，包括使用權利要求1～15中任一項所述的生產乳酸的大腸桿菌，由來自植物的含有蔗糖的原料生產乳酸。