[發明專利]吲哚菁綠熒光乳劑

有效

• 申請號: 200980134613.1
• 申請日: 2009-08-13
• 公開（公告）號: CN102143763A
• 公開（公告）日: 2011-08-03
• 發明（設計）人: M·古泰耶;F·納瓦羅加爾恰;I·泰克希爾-諾蓋斯
• 申請（專利權）人: 原子能及能源替代委員會
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李華英

本發明涉及可以用作診斷試劑，特別是用于熒光成像的新吲哚菁綠制劑及其制備方法和應用。

[現有技術]

熒光成像是基于將熒光標記注入動物或人并且檢測熒光標記定位的成像技術。探測儀器由此包含熒光標記激發源和用于檢測該標記發射的熒光的檢測器。

當前，熒光成像作為其他方法的互補成像技術出現，例如MRI(磁共振成像)、PET(正電子發射斷層攝影術)、SPECT(單光子發射計算機斷層攝影術)、超聲回波描技術、放射攝影術或X-斷層攝影術。

熒光成像具有超過其他成像技術的許多優勢：

-它不使用電離射線且由此無需放射防護或放射性廢棄物的復雜處置；

-探測儀器是低廉、簡潔和使用簡單的；

-采集時間極短；

-它是在所注射標記的濃度方面極為敏感的技術，所述標記的濃度遠低于MRI并且與用于PET和SPECT的濃度類似；

-它是一種技術，當對一定等級的小動物或器官進行非侵害性成像時其分辨率與核磁成像(PET、SPECT)類似，并且在使用顯微鏡檢查技術時可以具有細胞分辨本領。

目前，在美國熒光蛋白和吲哚菁綠是批準用于在人體內注射的熒光團。

吲哚菁綠，下文稱作ICG，在名稱Cardiogreen(Akorn?Inc.)、Infracyanine(Serb)、ICG-Pulsion(Pulsion?Medical?System)下銷售。該化合物具有下式：

它是在近紅外發射的熒光團。該范圍對熒光成像具有特別的意義，因為與可見光范圍相比，組織吸收光更少，組織擴散光更少，且組織的自發熒光減少。

由于該原因，所以吲哚菁綠是目前用于熒光成像臨床應用所選擇的熒光團。

然而，ICG具有一些特性，這些特性賦予其作為熒光標記的應用存在問題。

首先，ICG是具有5-10mg/ml溶解度的兩親化合物且由此難溶于水。在較高濃度下，形成具有不同光譜特性的二聚體或聚集物。

此外，ICG在水溶液中具有極差的穩定性和低熒光量子收率，尤其是由于形成那些難以發射的二聚體。因此，FDA要求在注入患者前10小時以內制備溶液。

此外，當通過靜脈內途徑注射時，ICG被吸附在血漿蛋白上至相當可觀的程度，這就改變了吸收和發射光譜。

此外，ICG的熒光壽命(0.5ns)極為接近于生物組織的自發熒光壽命(典型地0.3-0.4ns)。因此，使用基于脈沖發光激發的熒光裝置難以區分ICG熒光與組織自發熒光。

最終，ICG不具有能夠與靶生物分子或例如抗體、肽類、糖類、蛋白質、寡核苷酸或適體偶合的接枝基團。靶分子的接枝是有價值的，因為在全身注射后，能夠在體內所關注的區域檢測到熒光團，可以導致ICG優先在所成像的區域蓄積，且由此使檢測靈敏度增加。

已經提出了大量ICG制劑來克服那些問題中的一些。

因此，為了通過光凝固法治療損害，專利申請WO?2001/017561提出了ICG制劑，使得其溶解度和化學穩定性增加，這些制劑包含醇、緩沖液、表面活性劑、甘油、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、油、紅細胞、脂肪酸和抗微生物劑。專利申請US?2004/0156782描述了凍干形式的用于血管造影術、測定肝或心臟清除率或測定血流的ICG制劑。

專利申請WO?2003/057259描述了基于脂質體并且能夠增加熒光團溶解度的ICG制劑。未指定熒光團的位置。然而，由于在形成脂質體后加入熒光團，所以推定它被吸附在脂質體表面。此外，這種制劑的穩定性少于1個月。最終，脂質體是雙層殼的囊泡且一般具有大于100nm直徑的粒度；該粒度的顆粒溶液發散光且不允許令人滿意的血液循環外滲至腫瘤組織和細胞中的內化(internalisation)。

還提出將ICG吸附在負荷分子(cargomolecules)上，尤其是為了增加其血液半衰期。例如，WO?2005/082423描述了通過血清白蛋白的非特異性吸附與ICG共軛。然而，基于非共價吸附鍵的制劑具有低化學穩定性且限制了可以使用的生物靶配體的選擇。因此，大力研究的小靶向肽類例如cRGD即血管發生標記(Haubner等人JACS?1996，118，7461-7472)不能與ICG結合以通過那些方法產生熒光標記。