[發明專利]包含白介素-11類似物的生物聚合物綴合物

有效

• 申請號: 200980133683.5
• 申請日: 2009-08-21
• 公開（公告）號: CN102131518A
• 公開（公告）日: 2011-07-20
• 發明（設計）人: 樸明玉;金明淑;胡成炫;鄭允姬
• 申請（專利權）人: 百療醫株式會社;百聚生物有限公司
• 主分類號: A61K38/20
• 分類號: A61K38/20
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 顧晉偉;彭鯤鵬

發明領域

本發明屬于生物治療領域。具體而言，本發明涉及包含人白介素-11類似物或突變體(mIL-11)的生物聚合物綴合物，其中與成熟的重組人IL-11(rhIL-11)相比，所述mIL-11顯示了增強的穩定性，而且所述生物聚合物綴合物基本保持與mIL-11相同水平的活性。

背景技術

血液毒性(表現為中性粒細胞減少和血小板減少)是與癌癥化療相關的有害副作用，經常限制施用給患者的抗腫瘤藥物劑量。已經顯示白介素11(IL-11)(與多種造血和非造血細胞類型相互作用的基質細胞源性細胞因子)的體內施用提高血小板計數并具有有利的血小板生成作用。IL-11在干細胞分化為巨核細胞、巨核細胞的增殖和成熟以及血小板的生成中起重要作用。

重組人IL-11(rhIL-11)在與癌癥化療相關之副作用的治療中有潛在應用。當施用給動物時，在正常和免疫抑制兩種動物中，rhIL-11均增多巨核細胞生成并提高血小板計數。Wyeth-Ayerst已在出售名為(通用名奧普瑞白介素(oprelvekin))的rhIL-11產品，已批準其在嚴重血小板減少癥風險高的非骨髓惡性腫瘤成年患者進行骨髓抑制性化療后，用于預防嚴重的血小板減少癥并降低對血小板輸注的需要。以凍干粉末的形式在含5mg?IL-11的一次性管中提供。在1mL的USP標準注射用滅菌水中重構粉末，以生成含5mg/mL?IL-11的溶液，以50μg/kg/天的劑量施用。與相關的最常見副作用包括房性心律失常、暈厥、呼吸困難、充血性心力衰竭和肺水腫。

盡管已經顯示體內施用rhIL-11對預防正在接受癌癥化療之患者的血小板計數降低具有已證明的藥理學作用，但是所需的施用頻率(通常是每天一次持續兩周或更長時間)高于理想頻率。而且，盡管如IL-11的細胞因子是有吸引力的治療劑，但是它們的應用經常由于它們經尿排泄、肝攝取和/或酶降解的快速清除而受限制。似乎腎和肝對rhIL-11從動物體內循環中快速清除起主要作用。該快速清除可能是由于rhIL-11的低分子量(約19kDa)和其高度陽離子化的特性。由于腎小球毛細血管壁對大分子的選擇滲透性主要基于分子大小，用水溶性聚合物對rhIL-11進行化學修飾可以限制腎小球對該蛋白的過濾。

作為應對循環時間短的方法，已經對用生物聚合物(如聚乙二醇(PEG)分子)修飾重組蛋白進行了研究。已經顯示PEG聚合物與蛋白的綴合(PEG化)通過增加蛋白的流體動力學半徑而使其免于快速的腎清除，從而提高了生物利用度，而且綴合也提高了溶解度。此外，由于PEG聚合物的龐大，PEG綴合蛋白顯示出蛋白降解的降低以及免疫識別的降低，這給予PEG化蛋白很多優勢(Veronese?FM和Pasut?G.，DrugDiscovery?Today?10：1451-8(2005))。另一方面，PEG綴合蛋白對蛋白水解酶或抗體之敏感性的抑制能力也會妨礙該蛋白與其受體結合的能力。因此PEG綴合蛋白與受體的結合親和性會降低，特別是當綴合位點涉及受體結合位點或與其緊密相鄰時。

為了應對將rhIL-11存留在循環中的需要，研究者已經調查了用水溶性聚合物聚乙二醇(PEG)化學修飾rhIL-11的可行性。參見Takagi等，Journal?of?Controlled?Release?119：271-278(2007)。然而，如上所述，用PEG對rhIL-11進行化學修飾存在很多缺點。由于所附PEG的龐大和空間位阻，PEG-rhIL-11綴合物可能不能與IL-11受體結合或與其最低程度地結合。而且，rhIL-11分子的生物活性可能降低。事實上，Takagi等證明，盡管與未綴合rhIL-11相比，PEG-rhIL-11綴合物可在血漿中存留更長時間，并因此對血小板計數的增加產生可測量的作用，但由于與PEG的綴合，PEG化-rhIL-11所保留的生物活性降低。Takagi等，Journal?ofControlled?Release?119：271-278(2007)。因此為了獲得目標效果，需要施用更大量的PEG-rhIL-11綴合物。

本發明應對了對IL-11分子的需要，其當施用給患者時，不止在血漿中存留更長時間，還保持生物活性，因此提高了其在治療和預防與癌癥化療相關的血小板減少癥及其它血液毒性中的作用。

發明簡述

本發明提供了IL-11類似物和生物相容性聚合物的綴合物。與rhIL-11相比，本發明的IL-11類似物(mIL-11)對酸解顯示出增強的抗性，并且顯示出增強的穩定性。而且，本發明的綴合物具有以下特征：與對應的未綴合mIL-11相比具有更長的血清半衰期，并且因如下事實表現突出，即該綴合物未顯示活性缺失。