[發(fā)明專利]去飽和酶和在轉(zhuǎn)基因生物中產(chǎn)生多不飽和脂肪酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200980119681.0
• 申請(qǐng)日: 2009-04-29
• 公開（公告）號(hào): CN102066564A
• 公開（公告）日: 2011-05-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·鮑爾;J·A·內(nèi)皮爾;O·薩亞諾娃
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 羅特哈姆斯泰德研究有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/82
• 分類號(hào): C12N15/82;C12N9/02;C12N15/53;C12P7/64;A01H5/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 黃革生;林柏楠

1.多核苷酸，其包含選自以下的核酸序列：

(a)SEQ?ID?NO：1顯示的核酸序列；

(b)編碼具有SEQ?ID?NO：2顯示的氨基酸序列的多肽的核酸序列；

(c)與(a)或(b)的核酸序列之一具有至少70％同一性，并且編碼具有去飽和酶活性的多肽的核酸序列；和

(d)(a)、(b)或(c)的核酸的片段的核酸序列，其中該片段編碼具有去飽和酶活性的多肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的多核苷酸，其中該多核苷酸由RNA或DNA組成。

3.包含根據(jù)權(quán)利要求1或2的多核苷酸的載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3的載體，其中所述載體是表達(dá)載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4的載體，其中所述載體包含至少一種其它多核苷酸，所述多核苷酸編碼涉及脂類或脂肪酸生物合成的其它酶。

6.宿主細(xì)胞，其包含根據(jù)權(quán)利要求1或2的多核苷酸，或包含根據(jù)權(quán)利要求3-5任一項(xiàng)的載體。

7.根據(jù)權(quán)利要求6的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞還包含至少一種涉及脂類或脂肪酸生物合成的其它酶。

8.根據(jù)權(quán)利要求5的載體或根據(jù)權(quán)利要求7的宿主細(xì)胞，其中所述酶選自：酰基-CoA脫氫酶、酰基-ACP[＝酰基載體蛋白]去飽和酶、酰基-ACP硫酯酶、脂肪酸酰基轉(zhuǎn)移酶、酰基-CoA：溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶、脂肪酸合酶、脂肪酸羥化酶、乙酰輔酶A羧化酶、酰基輔酶A氧化酶、脂肪酸去飽和酶、脂肪酸炔屬酶、脂加氧酶、三酰基甘油脂肪酶、氧化丙二烯合酶、氫過氧化物裂合酶、脂肪酸延伸酶、Δ4去飽和酶、Δ5去飽和酶、Δ6去飽和酶、Δ8去飽和酶、Δ9去飽和酶、Δ12去飽和酶、Δ5延伸酶、Δ6延伸酶和Δ9延伸酶。

9.產(chǎn)生具有去飽和酶或延伸酶活性的多肽的方法，包括步驟：

(a)在宿主細(xì)胞中表達(dá)根據(jù)權(quán)利要求1或2的多核苷酸；和

(b)從宿主細(xì)胞中獲得由根據(jù)(a)的多核苷酸編碼的多肽。

10.多肽，其由根據(jù)權(quán)利要求1或2的多核苷酸編碼或通過權(quán)利要求9的方法可獲得。

11.特異性識(shí)別根據(jù)權(quán)利要求10的多肽的抗體。

12.轉(zhuǎn)基因非人生物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1或2的多核苷酸、根據(jù)權(quán)利要求3-5任一項(xiàng)的載體或根據(jù)權(quán)利要求8的宿主細(xì)胞。

13.根據(jù)權(quán)利要求12的轉(zhuǎn)基因非人生物，其中所述生物是動(dòng)物、植物或多細(xì)胞微生物。

14.產(chǎn)生具有下文通式I所示結(jié)構(gòu)的物質(zhì)的方法

其中，變量和取代基如下：

R¹＝羥基、輔酶A(硫酯)、溶血磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰甘油、溶血二磷脂酰甘油、溶血磷脂酰絲氨酸、溶血磷脂酰肌醇、鞘堿或者通式II的原子團(tuán)

R²＝氫、溶血磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰甘油、溶血二磷脂酰甘油、溶血磷脂酰絲氨酸、溶血磷脂酰肌醇，或者飽和或不飽和的C₂-C₂₄-烷基羰基，

R³＝氫、飽和或不飽和的C₂-C₂₄-烷基羰基，或者R²和R³相互獨(dú)立地為式Ia的原子團(tuán)：

n＝2、3、4、5、6、7或9，m＝2、3、4、5或6，和p＝0或3；

并且其中，該方法包括在允許所述物質(zhì)的生物合成的條件下，培養(yǎng)(i)根據(jù)權(quán)利要求3-5任一項(xiàng)的宿主細(xì)胞，或(ii)根據(jù)權(quán)利要求12或13的轉(zhuǎn)基因非人生物。

15.用于生產(chǎn)油、脂類或脂肪酸組合物的方法，包括根據(jù)權(quán)利要求14的方法的步驟，和將所述物質(zhì)配制成油、脂類或脂肪酸組合物的其它步驟。

16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中將所述油、脂類或脂肪酸組合物進(jìn)一步配制產(chǎn)生藥物、化妝品、食品、飼料，優(yōu)選魚飼料或食品添加物。