[發明專利]針對粒細胞巨噬細胞集落刺激因子的抗體

有效

• 申請號: 200980118423.0
• 申請日: 2009-04-28
• 公開（公告）號: CN102037016A
• 公開（公告）日: 2011-04-27
• 發明（設計）人: 克里斯托弗·R·貝炳東;肯尼思·魯爾森;杰弗里·T·亞蘭東
• 申請（專利權）人: 卡羅拜奧斯制藥公司
• 主分類號: C07K16/22
• 分類號: C07K16/22;C12P21/08
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

相關申請的交叉引用

本申請要求于2008年4月28日提交的美國第61/048,522號臨時申請的權益，該申請通過引用的方式并入本文中。

發明背景

“粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)”是在響應多種炎癥介質時由存在于造血環境和炎癥外周部位的細胞產生的小糖蛋白。GM-CSF能夠刺激來自骨髓細胞的嗜中性粒細胞、巨噬細胞以及混合的粒細胞-巨噬細胞集落的產生，并且能夠刺激來自胎兒肝臟祖細胞的嗜酸性集落的形成。GM-CSF還能夠刺激成熟粒細胞和巨噬細胞的功能性活動，以及抑制粒細胞和巨噬細胞的凋亡。

已提出GM-CSF在多種疾病的發病機理中起作用。因此需要靶向GM-CSF的額外治療。本發明提供了改良的抗-GM-CSF抗體，例如，用于治療GM-CSF為致病機制的一部分的疾病。

發明概述

一方面，本發明提供了抗-GM-CSF抗體，例如，人工程化的(humaneered)抗體，以及利用所述抗體治療疾病的的方法，對這些疾病而言，抑制GM-CSF受體信號傳導是理想的。因此，在一些實施方案中，本發明提供了抗-GM-CSF抗體，其包括含CDR3結合特異性決定簇RQRFPY或RDRFPY、J節段和V-節段的重鏈可變區，其中J-節段包含與人JH4(YFDYWGQGTLVTVSS)至少95％的一致性，以及V-節段包含與人種系VH1?1-02或VH1?1-03序列至少90％的一致性；或者含CDR3結合特異性決定簇的重鏈可變區，該特異性決定簇包括RQRFPY。在一些實施方案中，J節段包含YFDYWGQGTLVTVSS。在一些實施方案中，CDR3包含RQRFPYYFDY或RDRFPYYFDY。在一些實施方案中，重鏈可變區CDR1或CDR2能夠是人種系VH1序列；或者CDR1和CDR2能夠是人種系VH1。在一些實施方案中，抗體包含人重鏈可變區CDR1或CDR2，或者CDR1和CDR2兩者，如在圖1中列出的V_H區所示。在一些實施方案中，本發明的抗體的V-節段具有圖1所示的V_H?V節段序列。在一些實施方案中，本發明的抗體包含的V_H具有圖1列出的VH#1，VH#2，VH#3，VH#4或VH#5序列。

本發明還提供了例如，具有上段中描述的重鏈可變區的抗-GM-CSF抗體，，其中該抗體包括含CDR3結合特異性決定簇FNK或FNR的輕鏈可變區。在一些實施方案中，這種抗體包含人種系JK4區。在一些實施方案中，抗體V_L區CDR3包含QQFN(K/R)SPLT.，例如QFNKSPLT。在一些實施方案中，輕鏈可變區包含圖1所示的V_L區的CDR1或CDR2，或者CDR1和CDR2兩者。在一些實施方案中，V_L區包含與圖1所示的VKIIIA27V節段序列具有至少95％一致性的V節段。在一些實施方案中，V_L區具有圖1所示的VH#1，VH#2，VH#3或VH#4序列。

在一些實施方案中，本發明的抗體的單價親和力優于約10nM，經常優于(低于)約500pM或優于約50pM，這通過在37℃進行的表面等離子共振分析來測定，所述抗體例如具有選自圖1中的V_H區序列的V_H區序列以及選自圖1中的V_L區序列的V_L區。因此，在一些實施方案中，本發明的抗體的親和力(如利用表面等離子共振測量的)低于50pM，通常低于約25pM，或甚至低于約10pM。在一些實施方案中，本發明的抗-GM-CSF具有慢解離速率，對于與GM-CSF的單價相互作用，通過在37℃的表面等離子共振分析測定的解離速率常數(kd)低于約10^-4s^-1，優選低于5x?10^-5s^-1，以及最優選低于10^-5s^-1。在一些實施方案中，本發明的抗體的解離速率比在相同條件下測定的參考嵌合c19/2單克隆抗體慢2至3倍，但在測量GM-CSF活性的基于細胞測定中，中和GM-CSF活性的效能比參考抗體的效能大至少6-10倍。