[發(fā)明專利]用于測量置于分析腔室內(nèi)的樣本的面積的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980117670.9
• 申請日: 2009-04-09
• 公開（公告）號: CN102027350A
• 公開（公告）日: 2011-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 尼滕·V·拉爾普里亞;斯蒂芬·C·沃德洛
• 申請（專利權(quán)）人: 艾博特健康公司
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14;G06T7/00;G06T7/60
• 代理公司: 北京天昊聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11112
• 代理人: 陳源;張?zhí)焓?/td>

本申請要求于2008年4月9日提交的美國臨時專利申請序列號為61/043,567的優(yōu)先權(quán)，其公開的主題以引文方式并入本文。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明總的來說涉及用于分析生物流體樣本的方法，具體地涉及用于確定分析腔室內(nèi)被樣本填充的面積的設(shè)備及方法。

背景技術(shù)

內(nèi)科醫(yī)生、獸醫(yī)和科學(xué)家檢查人類和動物的生物流體(尤其是血液)，以確定組分的數(shù)量以及識別是否存在在健康的受試者中沒有發(fā)現(xiàn)的異常微粒。通常被測量、定量和識別的組分包括紅細(xì)胞(RBC)、白細(xì)胞(WBC)和血小板。

在諸如Wintrobe’s?Clinical?Hematology第12版的醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中詳細(xì)描述的已知的血液檢查技術(shù)通常將檢查方法分為手動、離心和阻抗型方法。手動方法通常涉及產(chǎn)生精確確定的血液或流體樣本的體積，該血液或流體樣本被定量稀釋并且在計數(shù)室中被直觀計數(shù)。手動檢查方法包括檢查其中通過目測確定微粒類型的相對量的外周涂片。離心檢查方法涉及對樣本進(jìn)行離心，使得根據(jù)組分的相對密度將樣本分成多個組分層。可以給組分層染色，以增強可見性或檢測性。阻抗型方法涉及檢查根據(jù)被測量的微粒而處理的血液的精確體積；例如溶解RBC來計數(shù)有核細(xì)胞以及在導(dǎo)電流體中體積(volumetrically)稀釋樣本。該過程通常涉及監(jiān)視施加給通過窄通道的樣本的電流或電壓，以確定當(dāng)微粒以單行通過時微粒對電流/電壓的影響。其他技術(shù)涉及對通過光束入射到以單行通過的微粒的光的強度和散射角的分析。

除了外周涂片或離心分離之外，上述所有方法都要求滴涂精確的樣本體積。樣本體積的不精確將導(dǎo)致相關(guān)分析中同一數(shù)量的定量誤差。除了離心方法之外，上述所有方法還都要求樣本與一種或多種液體試劑或稀釋劑混合，并且為了獲得精確的結(jié)果還要求對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。在外周涂片的情況下，需要高度訓(xùn)練來正確地檢查涂片。上述的許多方法產(chǎn)生大量的污染物，而處理這些污染物是昂貴的。

發(fā)明內(nèi)容

根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供了一種用于確定分析腔室中被靜止地停留在腔室內(nèi)的生物流體樣本覆蓋的面積的方法。該腔室包括具有內(nèi)表面的第一平板和具有內(nèi)表面的第二平板，這兩個平板都是透明的。該方法包括以下步驟：a)用一個或多個波長的光照射停留在分析腔室內(nèi)的樣本，所述的一個或多個波長的光可用于加亮樣本與空氣之間的界面以及加亮樣本內(nèi)的組分；b)用一個或多個波長的光對樣本成像，并且產(chǎn)生表示一個或多個波長的光與樣本的相互作用的圖像信號；c)使用圖像信號，確定樣本與空氣之間的至少一個界面的位置；d)使用圖像信號，確定樣本內(nèi)的一個或多個組分相對于所述的至少一個樣本與空氣之間的界面的位置；以及e)使用一個或多個組分和至少一個樣本與空氣之間的界面的位置來確定包含樣本的腔室的面積。

具有由均勻高度分隔開的一對透明平板的分析腔室提供了用于分析樣本的方便工具。對于很多分析，已知被分析樣本的體積是有用的(或者是需要的)，但是很難分配精確已知的樣本量。為了避免分配精確已知的樣本量的問題，測量在上述分析腔室中產(chǎn)生的薄膜的面積并且將該面積乘以腔室高度來確定所添加的樣本體積將是有用的。如果血液(或者其他生物流體)將以幾何上完美的形狀分布，則這將相對容易，但是由于從樣本的應(yīng)用角度考慮它們在腔室中蔓延，因此樣本中通常捕獲有氣泡或者具有蜿蜒的邊緣。確定腔室內(nèi)的樣本的面積的任務(wù)對于具有少量紅細(xì)胞的血液樣本來說尤其存在問題，在具有少量紅細(xì)胞的血液樣本中，相對透明的血漿將與絕大多數(shù)樣本分離，并且如果樣本面積的著色是用于樣本面積計算的唯一標(biāo)準(zhǔn)，則在面積計算中可能不會包括這個相對無色的區(qū)域。本發(fā)明的方法提供了一種確定均勻高度的腔室中的樣本面積從而確定樣本體積的方法，因此提供了一種對與分配精確樣本體積相關(guān)的問題的解決辦法。

通過下面提供的包括附圖的詳細(xì)描述，本發(fā)明的方法及與其有關(guān)的優(yōu)點將更加顯然。

附圖說明

圖1是包含血液樣本的分析腔室的示意截面圖。

圖2是分析腔室實施例的示意截面圖。

圖3是分析腔室實施例的示意截面圖。

圖4是分析腔室實施例的示意截面圖。

圖5是分析腔室的示意平面圖。

圖6是置于腔室內(nèi)的血液樣本的示意圖像，該血液樣本被照射以加亮置于樣本內(nèi)的紅細(xì)胞。

圖7是如圖6所示的置于腔室內(nèi)的血液樣本的示意圖像，該血液樣本被照射以加亮樣本和樣本內(nèi)的空氣之間的界面。

圖8是如圖6和圖7所示的置于腔室內(nèi)的樣本的示意圖像，其中樣本包含被數(shù)字遮蔽的區(qū)域。

具體實施方式