[發明專利]使用包被的納米顆粒的靈敏的免疫測定

有效

• 申請號: 200980116000.5
• 申請日: 2009-04-08
• 公開（公告）號: CN102016585B
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: K·韋德梅爾;C·桑德曼;R·A·富爾徹;M·庫羅達;L·P·奧爾菲恩;A·C·柯里
• 申請（專利權）人: 貝克頓·迪金森公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所11038
• 代理人: 羅菊華

相關申請

本申請要求對2008年4月9日提交的美國臨時申請案61/071,035的優先權，所述臨時申請案通過引用合并入本文。

領域

提供了包被的納米顆粒，其包含由增加納米顆粒的反射率的殼包圍的核心，其中包被的納米顆粒不必，但任選地可包含拉曼活性分子(Raman-active molecule)。本文中公開的包被的納米顆?？捎糜诙亢?或定性測定液體樣品中分析物的存在或不存在的測試裝置和方法。

背景

免疫測定技術提供了用于確定分析物在生物學樣品中的存在或不存在的簡單和相對快速的方法。免疫測定診斷測試提供的信息對于病人的醫療護理通常是至關重要的。通常進行測定以定性或定量檢測特定分析物(例如當人受試者具有特定疾病或狀況時存在的抗體)的存在。本領域內實施的免疫測定非常多，包括用于疾病(例如由細菌或病毒引起的感染)或狀況(例如懷孕)的測定。

各種類型的免疫測定在本領域內是已知的。免疫測定法的一個類型是側流免疫測定(lateral flow immunoassay)。側流免疫測定利用固體支持物例如硝酸纖維素、塑料或玻璃進行分析物的檢測。不同于使樣品垂直通過支持物(如在“流動通過(flow-through)”測定的情況下)，通過毛細管作用和其他力，允許樣品沿著支持物在表面上從加樣區(application zone)側流至反應區。在側流測定中，捕獲抗體以條帶的形式分布在固體支持物上。將檢測抗體綴合至提供可檢測的信號的檢測分子。將液體樣品與檢測抗體接觸，讓樣品/檢測抗體混合物沿著固體支持物流動。如果分析物存在，則在固體支持物上在捕獲抗體分布的位置上形成“夾心”復合物。然后通過目視或使用儀器檢測來自定位在捕獲線上的檢測分子的信號。側流測定可設計用于檢測目的蛋白質、核酸、代謝物、細胞、小分子或其他分析物。

另一個免疫測定形式是流動通過免疫測定。流動通過免疫測定通常使用其上覆有或其中已整合了包含試劑的基質的多孔材料。將測試樣品施加于并且流動通過多孔材料，樣品中的分析物與試劑反應，從而在多孔材料上產生可檢測的信號。通常將此類裝置封裝在具有刻度的塑料殼(plastic housing)或塑料盒(plastic casing)中以幫助檢測特定分析物。

可用于側流免疫測定的不同類型的檢測分子的許多實例在本領域中是已知的，例如熒光團、膠體金、標記膠乳顆粒和納米顆粒例如量子點或表面增強拉曼散射(“SERS”)納米顆粒。例如，美國專利5,591,645描述了在不使用儀器的情況下可看到的可見“示蹤”分子例如膠體金的用途。此外，屬于Natan的美國專利6,514,767公開了SERS活性復合納米顆粒(SACN)，其包括表面附著或結合了一個或多個拉曼活性分子并且被包括聚合物、玻璃或任何其他絕緣體材料的殼包裹的金屬納米顆粒。美國專利5,714,389描述了側流免疫測定法和使用有色顆粒(其可以是金屬膠體，優選膠體金)的測試裝置。類似地，美國專利7,109,042描述了使用直接標記例如金溶膠和染料溶膠的側流免疫測定裝置，所述直接標記允許產生即時分析結果而無需加入另外的試劑來產生可檢測的信號。

SERS是用于進行化學分析，允許檢測單個分子的最靈敏的方法之一。參見Nie，S.和S.R.Emory，″Probing Single Molecules and Single Nanoparticles by Surface Enhanced Raman Scattering″，Science，275，1102(1997)。拉曼光譜，與紅外光譜相似，包括相應于分子振動(其對于被分析的樣品(分析物)是特異的)的波段的波長分布。在拉曼光譜法的實踐中，來自光源(通常激光器)的光束聚焦在樣品上，從而產生非彈性散射輻射，其可通常光學方法收集并且被導入其中檢測器將碰撞光子的能量轉化成電信號強度的波長色散光譜儀(wavelength-dispersive spectrometer)或傅里葉變換分光儀(Fourier transform spectrometer)。