[發明專利]基于結合EGFR的工程化蛋白質的靶向治療劑

無效

• 申請號: 200980113198.1
• 申請日: 2009-02-10
• 公開（公告）號: CN102007145A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發明（設計）人: 雷·坎普豪森;布倫特·莫斯;斯圖爾特·伊曼紐爾;戴維·法布里齊奧
• 申請（專利權）人: 百時美施貴寶公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12N15/10
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 羅天樂

1.一種包含纖連蛋白III型(Fn3)結構域的多肽，其中所述Fn3結構域(i)包含環AB、環BC、環CD、環DE、環EF、和環FG；(ii)選自環BC、DE和FG中的至少一個環相對于人Fn3結構域的相應環的序列具有改變的氨基酸序列；且(iii)以小于10^-4M的解離常數結合人表皮生長因子受體(EGFR)。

2.權利要求1的多肽，其中所述Fn3結構域以小于10^-6M的解離常數結合人EGFR。

3.權利要求1或2的多肽，其中環BC和環FG相對于人Fn3結構域的相應環的序列具有改變的氨基酸序列。

4.權利要求1-3任一項的多肽，其中所述Fn3結構域是第十纖連蛋白III型結構域(¹⁰Fn3)。

5.權利要求4的多肽，其中所述¹⁰Fn3結構域包含選自下列的多肽：

(i)包含SEQ?ID?NO：207-231中任一氨基酸序列的多肽；和

(ii)包含與SEQ?ID?NO：207-231中任一氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列的多肽。

6.權利要求1-5任一項的多肽，進一步包含一個或多個選自下述的藥動學(PK)模塊：聚氧化烯模塊、人血清白蛋白結合蛋白、唾液酸、人血清白蛋白、IgG、IgG結合蛋白、運鐵蛋白、和Fc片段。

7.權利要求6的多肽，其中所述PK模塊是聚氧化烯模塊，且所述聚氧化烯模塊是聚乙二醇。

8.權利要求6的多肽，其中所述PK模塊和所述Fn3結構域是藉由至少一個二硫鍵、肽鍵、多肽、聚合糖、或聚乙二醇模塊可操作連接的。

9.權利要求8的多肽，其中所述PK模塊和所述Fn3結構域是藉由包含氨基酸序列SEQ?ID?NO：232-235的多肽可操作連接的。

10.權利要求1-9任一項的多肽，還包含選自抗體模塊、脂籠蛋白衍生物、四連蛋白衍生物、avimer、錨蛋白衍生物、以及第二纖連蛋白III型(Fn3)結構域的第二結構域，其中所述第二結構域與人蛋白質結合，且其中所述第二Fn3結構域(i)包含環AB、環BC、環CD、環DE、和環FG；(ii)選自環BC、DE、和FG中的至少一個環相對于人Fn3結構域的相應環的序列具有隨機化的氨基酸序列；且(iii)結合不被人Fn3結構域結合的人蛋白質。

11.權利要求10的多肽，其中所述第二結構域是第二Fn3結構域，且其中所述第二Fn3結構域以小于10^-4M的解離常數結合所述人蛋白質。

12.權利要求10或11的多肽，其中所述第二結構域是第二Fn3結構域，且其中所述第二Fn3結構域是第十纖連蛋白III型結構域(¹⁰Fn3)。

13.權利要求10-12中任一項的多肽，其中所述第二結構域所結合的人蛋白質選自IGF-IR、EGFR、或VEGFR2。

14.權利要求12的多肽，其中所述第二¹⁰Fn3結構域包含選自下述的多肽：

(i)包含SEQ?ID?NO：2-231和236中任一氨基酸序列的多肽；和

(ii)包含與SEQ?ID?NO：2-231和236中任一氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列的多肽。

15.權利要求10-14任一項的多肽，其中所述Fn3結構域和所述第二結構域是藉由至少一個二硫鍵、肽鍵、多肽、聚合糖、或聚乙二醇模塊可操作連接的。

16.權利要求10-15任一項的多肽，其中所述多肽抑制轉化生長因子α(TGF-α)或皮生長因子(EGF)結合EGFR，且在基于細胞的測定中在亞IC₅₀濃度不活化人EGFR。

17.權利要求10-16任一項的多肽，其中所述多肽與抗EGFR抗體競爭對EGFR的結合。

18.權利要求10-17任一項的多肽，其中所述多肽以小于10μM的IC₅₀抑制總EGF刺激的EGFR磷酸酪氨酸活化。