[發(fā)明專利]穩(wěn)定化的液體酶組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980110696.0
• 申請日: 2009-03-26
• 公開（公告）號: CN101981049B
• 公開（公告）日: 2016-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 洛恩·K·尼爾森;利斯·M·米克爾森;艾斯本·P·弗里伊斯;于爾根·C·F·諾伊策爾;奧勒·西蒙森;洛特·R·索倫森
• 申請（專利權(quán)）人: 諾維信公司
• 主分類號: C07K5/08
• 分類號: C07K5/08;C07K5/10;C07K2/00;C11D3/386
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 史悅

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及包含枯草桿菌蛋白酶(subtilisin)和作為枯草桿菌蛋白酶的穩(wěn)定劑的肽化合物的液體組合物。本發(fā)明亦涉及可用作枯草桿菌蛋白酶的穩(wěn)定劑的肽化合物。

發(fā)明背景

枯草桿菌蛋白酶類型的蛋白酶在液體水性洗滌劑領(lǐng)域中是眾所周知的，特別是其在衣物洗滌中的用途。在上述液體洗滌劑中通常面對的問題是枯草桿菌蛋白酶對所述組合物中其他酶以及枯草桿菌蛋白酶自身的降解。其結(jié)果，在所述液體洗滌劑組合物中枯草桿菌蛋白酶和其他酶的穩(wěn)定性降低，導致液體洗滌劑的洗滌性能降低。

現(xiàn)有技術(shù)主要致力于改善液體洗滌劑中酶的儲藏穩(wěn)定性，例如通過添加不同的枯草桿菌蛋白酶抑制劑或穩(wěn)定劑。已知硼酸和代硼酸(boronic acid)能夠可逆的抑制蛋白分解酶。

使用肽醛(peptide aldehyde)在液體洗滌劑中穩(wěn)定一些蛋白酶公開于WO94/04651、WO 98/13458、WO 98/13459、WO 98/13460和WO 98/13462。更具體而言，WO94/04651公開了使用肽醛Phe-Gly-Ala-PheH和Phe-Gly-Ala-LeuH以供穩(wěn)定枯草桿菌蛋白酶類型的蛋白酶。WO94/04651亦公開了Leu-Leu-TyrH作為合適的肽醛以供穩(wěn)定胰凝乳蛋白酶類型的蛋白酶。此外，WO94/04651建議使用氨基甲酸甲酯或甲基脲作為所述肽醛的N-末端保護基團。WO98/13460公開了使用肽蛋白酶抑制劑，或者是肽醛或者是三氟代甲基酮，其中所述肽鏈包含2-5個氨基酸，且所述醛/三氟甲基酮來源于氨基酸丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯甘氨酸(phenylglycine)、苯丙氨酸或高苯丙氨酸(homophenylalanine)，以及其中所述N-末端保護基團優(yōu)選為磺酰胺(sulphonamide)或酰胺基磷酸(amidophosphate)。

WO2007/141736、WO2007/145963和WO2007/145964公開了使用可逆的肽蛋白酶抑制劑以穩(wěn)定液體洗滌劑組合物。US2003/157088描述了含有經(jīng)抑制劑穩(wěn)定化的酶的組合物。

WO 96/41638和WO 2005/105826公開了肽醛和酮。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明人令人驚訝的發(fā)現(xiàn)一些肽醛或酮衍生物對于在水性組合物，如液體洗滌劑中穩(wěn)定枯草桿菌蛋白酶類型的蛋白酶特別有效，所述組合物包括具有OH-取代的苯丙氨酸作為C-末端殘基的肽化合物。

相應的，本發(fā)明提供了包含枯草桿菌蛋白酶和式B₂-B₁-B₀-R肽化合物的液體組合物，其中：

·R是氫、CH₃、CX₃、CHX₂或CH₂X，其中X是鹵素原子；且

·B₁是單氨基酸殘基。

B₀可為在對位和/或間位具有OH取代的苯丙氨酸殘基；而B₂可由一個或多個氨基酸殘基組成，B₂任選地包括N-末端保護基團。或者，B₀可為單氨基酸殘基；而B₂是有N-末端保護基團附接的Gly、Arg或Leu殘基。

本發(fā)明進一步提供了式B₂-B₁-B₀-R的肽化合物，其中：

·R是氫、CH₃、CX₃、CHX₂或CH₂X，其中X是鹵素原子；且

·B₁是單氨基酸殘基。

B₀可為在對位和/或間位具有OH取代的苯丙氨酸殘基；而B₂可由一個或多個具有芐氧羰基作為N-末端保護基團的氨基酸殘基組成，或B₂可為有N-末端保護基團附接的Gly、Arg或Leu殘基。或者，B₀可為單氨基酸殘基，而B₁可為小氨基酸殘基，而B₂可為有芳香族N-末端保護基團附接的Gly、Arg或Leu殘基。

發(fā)明詳述

定義

“氨基酸殘基”指具有類似-NH-CHR-CO-結(jié)構(gòu)的基團，書寫時N-末端在左而C-末端在右。