[發(fā)明專利]新型抗原結合二聚體-復合物及其制備方法和應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980107695.0
• 申請日: 2009-03-05
• 公開（公告）號: CN101965362A
• 公開（公告）日: 2011-02-02
• 發(fā)明（設計）人: 彼得·卡斯特爾;馬克·約瑟夫·勞韋里斯;帕特里克·斯坦森斯;克里斯蒂娜·拉伯;卡羅·布東;阿內(nèi)·布里熱;亨德里克斯·雷內(nèi)瑞斯·雅各布斯·馬托伊斯·霍根博姆;埃爾斯·安娜·艾麗斯·拜爾內(nèi)特
• 申請（專利權）人: 埃博靈克斯股份有限公司
• 主分類號: C07K16/00
• 分類號: C07K16/00;C07K16/22;C07K16/28;C07K16/36;C07K16/18
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 王旭

1.穩(wěn)定的NFD，其可通過包括濃縮包含至少一個單可變結構域的多肽的步驟的方法獲得。

2.按照權利要求1的穩(wěn)定的NFD，其中所述單可變結構域是納米抗體諸如VHH，人源化VHH，親合成熟的、穩(wěn)定化的或另外改變的VHH或其構建體。

3.按照權利要求1的穩(wěn)定的NFD，其中單可變結構域選自由SEQ?IDNO：1，SEQ?ID?NO：2，SEQ?ID?NO：3，SEQ?ID?NO：4，SEQ?ID?NO：5，SEQ?IDNO：6，SEQ?ID?NO：9和SEQ?ID?NO：10組成的組。

4.按照權利要求1的穩(wěn)定的NFD，其中單可變結構域選自由SEQ?IDNO：1，SEQ?ID?NO：2，SEQ?ID?NO：3，SEQ?ID?NO：4，SEQ?ID?NO：5，SEQ?IDNO：6，SEQ?ID?NO：9和SEQ?ID?NO：10組成的組。

5.按照權利要求1的穩(wěn)定的NFD，其中單可變結構域選自由SEQ?IDNO：1，SEQ?ID?NO：2，SEQ?ID?NO：3，SEQ?ID?NO：4，SEQ?ID?NO：5，SEQ?IDNO：6，SEQ?ID?NO：9和SEQ?ID?NO：10組成的組，和由與SEQ?ID?NO：1，SEQ?ID?NO：2，SEQ?ID?NO：3，SEQ?ID?NO：4，SEQ?ID?NO：5，SEQ?ID?NO：6，SEQ?ID?NO：9和SEQ?ID?NO：10中任一種具有至少70％同一性的功能性序列組成的組。

6.按照權利要求1的穩(wěn)定的NFD，其中單可變結構域選自由SEQ?IDNO：1，SEQ?ID?NO：2，SEQ?ID?NO：3，SEQ?ID?NO：4，SEQ?ID?NO：5，SEQ?IDNO：6，SEQ?ID?NO：9和SEQ?ID?NO：10組成的組，和由與SEQ?ID?NO：1，SEQ?ID?NO：2，SEQ?ID?NO：3，SEQ?ID?NO：4，SEQ?ID?NO：5，SEQ?ID?NO：6，SEQ?ID?NO：9和SEQ?ID?NO：10中任一種具有至少70％同一性的功能性序列組成的組；且其中所述序列特異性結合其至少一種靶分子。

7.按照權利要求1-6中任一項的穩(wěn)定的NFD，其中所述多肽基本由一個單可變結構域，多個單可變結構域，一個連接體或多個連接體組成。

8.按照權利要求1-7中任一項的穩(wěn)定的NFD，其中所述濃縮步驟在蛋白A柱上進行且其中將大量多肽加載至所述柱上，例如2-5mg/ml樹脂蛋白A。

9.按照權利要求1-8中任一項的穩(wěn)定的NFD，其中所述NFD與其靶分子的解離常數(shù)與其相應單體構件與所述靶分子的解離常數(shù)大致相同。

10.按照權利要求1-8中任一項的穩(wěn)定的NFD，其中不存在與其靶分子的特異性結合。

11.按照權利要求1-8中任一項的穩(wěn)定的NFD，其中所述NFD與其靶分子的解離常數(shù)是100nM以下。

12.包含至少一個單可變結構域的多肽；其中所述至少一個單可變結構域可以形成如權利要求1-11中所述的NFD。

13.制備按照權利要求1-11中任一項的NFD的方法，包括具有有利于疏水性相互作用的條件的處理步驟。

14.制備如權利要求1-11中所述包含至少一個單可變結構域，例如納米抗體的多肽的單體多肽的方法；其中制備所述多肽的每一步均不產(chǎn)生多于50％，優(yōu)選40％，更優(yōu)選30％，更優(yōu)選20％，甚至更優(yōu)選10％的相應NFD；且其中所述方法中的每一步均避免有利于疏水性相互作用的條件和/或其中所述方法避免這樣的條件，其中所述單可變結構域部分解折疊，例如CDR3通過例如升高的溫度諸如接近所述多肽解鏈溫度的溫度或例如37℃，在延長的時間，例如數(shù)周諸如例如4周內(nèi)，部分解折疊。

15.藥物制劑，包括i)包含易于二聚化的納米抗體的多肽；和ii)多元醇。