[發明專利]用于培養干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的合成表面

無效

• 申請號: 200980103921.8
• 申請日: 2009-01-29
• 公開（公告）號: CN101939362A
• 公開（公告）日: 2011-01-05
• 發明（設計）人: C·B·紹戈本;周悅;R·勃蘭登布格爾
• 申請（專利權）人: 杰龍公司;康寧股份有限公司
• 主分類號: C08J3/02
• 分類號: C08J3/02;C12N5/08
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 郭輝

優先權

本申請要求2008年1月30日提交的美國臨時申請61/063,010的優先權，其內容作為整體在本文中引用作為參考。

領域

本發明涉及細胞培養制品及其使用方法，更具體地說，涉及適于支持干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的培養的制品。

背景

多能干細胞如人類胚胎干細胞(hESC)具有分化為三種胚層中的任一種的能力，在人體中形成任何成人細胞類型。這種獨特的性能提供了用于開發對于大量嚴重的細胞退化疾病，如糖尿病、脊髓損傷、心臟病等的新治療方法的潛力。例如，脊髓損傷通常是不可逆的(使用現有的治療方法)，致使約250000美國人處于破壞性的位置。但是，隨著干細胞研究的發展，對于患有脊髓損傷的人而言喚起了新的令人激動的可能性。研究人員使用ES細胞衍生的神經細胞來治療動物試樣的神經系統失常。在早先的工作中，研究人員示出了老鼠ES細胞能被刺激以分化為神經細胞(當移植入具有神經失常的老鼠中時)，從而有助于回復正常功能。

但是，在開發這種基于hESC的治療方法的過程中存在阻礙。這些阻礙包括在組織培養中獲得并保持適量的未分化的hESC并控制其分化以產生特定的細胞類型。干細胞培養，如hES細胞培養通常用少量的來自細胞銀行或細胞庫的細胞做種，然后在未分化的狀態下擴增直至分化對于給定的治療用途是所需的。為了達到這點，hESC或其分化的細胞目前在含有動物衍生的成分的表面或介質(如滋養層、牛胎兒血清或)存在下培養。這些用于培養環境的動物衍生的添加物將細胞暴露于潛在有害的病毒或其它傳染性試劑下，這些有害的病毒或其它傳染性試劑會轉移到患者上或損害hESC的一般性培養和維持。另外，這些生物產品具有批變異、免疫響應和存儲壽命有限的缺點。

已經采取一些步驟來在不含動物衍生的成分的介質中或表面上培養hESC。但是，hESC或其分化的衍生物的響應能以預測，因為表面或培養介質的成分改變。當然也有一些優點。例如，已經在不含限定的血清的介質中培養hESC衍生的少突膠質細胞前體細胞(OPC)。雖然這種培養體系不是完全排外的培養體系(當使用的基體含有動物衍生的成分如動物膠和MATRIGEL時)，但是其確實提供了朝向hESC衍生的少突膠質細胞前體細胞最終臨床應用的步驟。作為進一步的例子，一些合成表面被證明能夠支持人類上皮干細胞分化為上皮細胞。但是，使用的體系依賴用于細胞培養的血清介質，其仍然會潛在地導致上述對于所有生物動物衍生的成分的問題。迄今為止，使用化學限定的介質和合成表面的完全不含動物的體系并未被證明可用于培養干細胞或延伸自干細胞的細胞。

簡述

本發明公開了，尤其是，可用于在化學限定的介質中培養干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的合成表面。

在一個實施方式中，提供了用于培養干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的方法。該方法包括：在聚合物材料上沉積含有干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的懸浮液，并在細胞培養介質中培養沉積的干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞。所述聚合物材料包含選擇的一種或多種丙烯酸酯單體的均聚物或共聚物。

在一個實施方式中，提供了干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的培養物。所述培養物包括具有置于表面上的聚合物材料的制品。該培養物還包括置于聚合物材料上的干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞以及其中培養了干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的培養介質。所述聚合物材料包含選擇的一種或多種丙烯酸酯單體的均聚物或共聚物。

在一個實施方式中，提供了用于在化學限定的介質中培養干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的細胞培養制品。所述制品包括具有表面和置于表面上的聚合物材料的基材。所述聚合物材料包含選擇的一種或多種丙烯酸酯單體的均聚物或共聚物。

本文中提供的各種實施方式中的一種或多種提供了一種或多種相比用于培養干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的現有表面的優點。例如，所述合成表面減少了與具有得自或衍生自動物源的成分的表面相關的污染組織。這些表面還可提供相比具有生物成分的那些表面改善的存儲壽命。在化學限定的介質中培養干細胞衍生的少突膠質細胞前體細胞的能力還減少了潛在的污染組織。另外，在合成表面或化學限定的介質的能力下，批與批之間的變異會更少，導致培養結果和預期的再現性改善。在結合附圖閱讀了本文后，這些及其它優點將從下述具體描述中容易明白。

附圖說明

圖1A-B是合成聚合物層涂覆的制品的側視圖。

圖2A-C是具有井的細胞培養制品的截面示意圖。未涂覆的(2A)；涂覆的表面(2B)；以及涂覆的表面和側壁(2C)。