[發(fā)明專利]血小板測定用試劑、血小板測定用試劑盒及血小板測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980101652.1
• 申請日: 2009-02-17
• 公開（公告）號: CN101910839A
• 公開（公告）日: 2010-12-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鈴木裕義;森山啟子;森悠丞;竹下浩生
• 申請（專利權(quán)）人: 希森美康株式會社
• 主分類號: G01N33/49
• 分類號: G01N33/49;G01N33/48;G01N33/483
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 王永紅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及血小板測定用試劑、血小板測定用試劑盒及采用它的血小板測定方法。更具體地說，本發(fā)明涉及作為用于測定血小板的色素尼羅藍(lán)，特別是含尼羅藍(lán)硫酸氫鹽的血小板測定用試劑。

背景技術(shù)

血液中的細(xì)胞，即白血球、網(wǎng)狀紅血球、紅血球等血球，采用流式細(xì)胞儀(flow?Cytometry)原理進(jìn)行迅速測定的方法已經(jīng)為人所知。

作為這種測定方法，例如，美國專利第6114173號公報(專利文獻(xiàn)1)公開一種全血試樣中網(wǎng)狀紅血球、紅血球及血小板的計數(shù)及鑒定的方法，以及采用該法的試劑組合物。具體地說，采用陽離子性色素，特別是采用含噁嗪750的試劑混合物染色網(wǎng)狀紅血球，采用流式細(xì)胞儀測定散射光信號及光吸收信號。然后，通過血液試樣中的紅血球與網(wǎng)狀紅血球的吸收信號的不同，根據(jù)含紅血球及網(wǎng)狀紅血球之組與血小板的散射光信號的不同進(jìn)行分類，分別決定其總數(shù)。

專利文獻(xiàn)1：美國專利第6114173號

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的課題

在測定血小板時，已知血液中出現(xiàn)的破碎紅血球或脂質(zhì)等，由于其大小與血小板類似，在測定時作為雜質(zhì)產(chǎn)生影響。特別是有必要輸血的血小板少的檢體在進(jìn)行測定時，這些雜質(zhì)的影響更大。這個問題，即采用美國專利第6114173號公報中記載的方法也產(chǎn)生的問題，關(guān)于抑制雜質(zhì)的影響測定血小板，在美國專利第6114173號中未作任何記載。

另外，作為能染色血小板的色素，在溶液中隨著時間的推移而被分解。采用流式細(xì)胞儀對血小板的測定，系對試樣中用色素染色的細(xì)胞照射光，檢測所得到的散射光及熒光來進(jìn)行。然而，由于采用含有的血小板染色用色素的量低的色素溶液，無法得到正確的散射光及熒光，因此，無法得到正確的測定結(jié)果。

本發(fā)明是鑒于上述課題提出的，本發(fā)明的目的是提供：盡管是含有妨礙血小板檢出的雜質(zhì)的檢體，也可抑制這種雜質(zhì)的影響以較高的精度測定血小板，并且保存穩(wěn)定性高的血小板測定用試劑及血小板測定用試劑盒，另一目的是提供以較高的精度測定血小板的血小板測定方法。

用于解決課題的手段

因此，本發(fā)明提供血小板測定用試劑，該試劑含有作為染色血小板的色素的、其抗衡離子為硫酸氫離子的尼羅藍(lán)。

另外，本發(fā)明提供血小板測定用試劑盒，該試劑盒包含：第1試劑，該第1試劑含有作為染色血小板的色素的、其抗衡離子為硫酸氫離子的尼羅藍(lán)；以及含緩沖劑的第2試劑。

另外，本發(fā)明提供血小板測定方法，該方法具有：向含有作為染色血小板的色素的、其抗衡離子為硫酸氫離子的尼羅藍(lán)的第1試劑與檢體，添加或不添加含緩沖劑的第2試劑，進(jìn)行混合，配制測定用試樣的步驟；以及

對得到的測定用試樣中的細(xì)胞照射光，檢測從該細(xì)胞發(fā)出的散射光及熒光的步驟；以及

根據(jù)檢出的散射光及熒光，檢出測定用試樣中含有的血小板的步驟。

另外，在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供血小板測定用試劑，該試劑含有作為染色血小板的色素的其抗衡離子為無機(jī)酸離子的尼羅藍(lán)與酸。

本發(fā)明進(jìn)一步提供血小板測定用試劑盒，該試劑盒包含：含有作為染色血小板的色素的尼羅藍(lán)與酸的第1試劑；以及含緩沖劑的第2試劑。

本發(fā)明還進(jìn)一步提供血小板測定方法，該方法具有：

向含有尼羅藍(lán)與酸的血小板測定用試劑、與檢體，添加或不添加含緩沖劑的第2試劑，進(jìn)行混合，配制測定用試樣的步驟；

對得到的測定用試樣中的細(xì)胞照射光，檢測從該細(xì)胞發(fā)出的散射光及熒光的步驟；以及

根據(jù)檢出的散射光及熒光，檢出測定用試樣中含有的血小板的步驟。

在本說明書中，所謂“尼羅藍(lán)”，例如，是指含有以下式(II)表示的、與用X^-表示抗衡離子形成鹽的狀態(tài)的化合物的色素：

(式中，X^-表示陰離子)。在本說明書中，當(dāng)對X^-表示的抗衡離子未作特別限定時，用式(II)表示的色素僅稱“尼羅藍(lán)”，當(dāng)抗衡離子表示特定的離子時，用式(II)表示的色素稱作“尼羅藍(lán)(特定的離子名)鹽”。例如，抗衡離子為硫酸根離子(1/2SO₄^2-)的尼羅藍(lán)稱作“尼羅藍(lán)硫酸鹽”，抗衡離子為硫酸氫根離子(HSO₄^2-)的尼羅藍(lán)稱作“尼羅藍(lán)硫酸氫鹽”。

附圖說明

圖1為盛放本發(fā)明的血小板測定用試劑盒的容器外觀圖。

圖2為試樣分析裝置的簡要構(gòu)成的正面圖。

圖3為試樣分析裝置的簡要構(gòu)成的方塊圖。

圖4為檢出部構(gòu)成的簡要平面圖。