[實用新型]己烯雌酚ELISA檢測試劑盒

有效

• 申請號: 200920173200.1
• 申請日: 2009-08-28
• 公開（公告）號: CN201535775U
• 公開（公告）日: 2010-07-28
• 發明（設計）人: 何方洋;萬宇平;馮才偉;馮才茂;趙正苗;汪善良;羅曉琴;劉玉梅;李勇;余厚美;蒲曉容
• 申請（專利權）人: 北京望爾康泰生物技術有限公司;北京望爾生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/545
• 分類號: G01N33/545;G01N33/52;G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

(一)技術領域：本實用新型涉及動物源性食品中藥物殘留量的檢測試劑盒，特別是檢測動物源性食品中己烯雌酚殘留量的試劑盒。

(二)背景技術：己烯雌酚是一種人工合成的非甾體雌激素，因其能促進蛋白質合成代謝，使動物日益增重，并能提高飼料功效，被大量非法應用。但由于己烯雌酚存在明顯的致癌性，可導致女性及其后代的生殖器官畸形和癌變，歐美等發達國家已相繼禁止或嚴格禁止使用。我國農業部第235號文件中規定，動物源性食品中己烯雌酚的殘留限量為不得檢出。

目前，己烯雌酚的測定方法主要有生物測定法和氣相色譜法等。微生物測定法雖然經濟，操作簡便，但在樣本中有其他微生物抑制劑存在時，其靈敏度和特異性受到限制；氣相色譜分析法的樣本前處理及其測定操作繁瑣，費用高，不宜于大量樣本篩查，推廣使用受到限制。本發明試劑盒是應用ELISA技術研發的新一代藥物殘留檢測產品，操作時間少，能最大限度地減少操作誤差和工作強度。

(三)實用新型內容：本實用新型所要解決的問題是提供一種小巧輕便的己烯雌酚殘留檢測試劑盒，其操作簡便，檢測快速、準確、靈敏度高，成本低，穩定性好，需要的技術含量不高，可進行一次連續多個樣品中己烯雌酚含量的測定，減少了檢測樣本所需要的時間。

本實用新型的技術方案是：檢測動物源性食品中己烯雌酚殘留量的酶聯免疫試劑盒，包括盒體和盒內的一塊96孔的酶標板、一張蓋板膜、14瓶試劑和放試劑的下凹瓶位、一個自封袋、一份說明書和一份質檢報告。采用96孔聚苯乙烯酶標板作為固相載體，酶標板由外框支撐架及放置其上的可拆的12條酶標反應微孔條組成，每個可拆裝酶標反應微孔條有8個反應孔，在試劑盒酶標板微孔條上預包被己烯雌酚偶聯抗原制成檢測板，放入真空鋁箔袋中，盒體為硬紙盒，以塑料硬膜為蓋板膜，將6瓶0.5ml梯度濃度的標準品濃縮液、1ml高濃度標準品溶液、12ml酶標二抗、0.8ml己烯雌酚抗體濃縮液、7ml顯色液A液、7ml顯色液B液、7ml終止液、40ml濃縮洗滌液、50ml濃縮復溶液，試劑用不同大小、不同顏色的塑料瓶和玻璃瓶盛裝并固定在泡沫塑料模具中與酶標板、蓋板膜、自封袋、說明書、質檢報告一同封裝在硬紙盒內，以便于攜帶和運輸。每一個試劑盒中的試劑足夠進行96次測定(包括標準分析孔)，既可進行一次連續多個樣品的檢測，也可以將板孔拆開多次檢測。將剩下的放回鋁箔袋中用自封袋密封，這樣可以保證試劑盒檢測結果的準確性。檢測時，樣本中的殘留的己烯雌酚藥物將和酶標板微孔條上預包被的偶聯己烯雌酚抗原競爭抗己烯雌酚抗體，加入酶標二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與樣本中己烯雌酚的殘留量成負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中己烯雌酚藥物的殘留量，其操作簡便易行。

經實驗表明本試劑盒具有很高的靈敏度：雞肉/肝、豬肉/肝、蝦、魚樣品的最低檢測限為0.6μg/kg、飼料樣品最低檢測限為48μg/kg、尿液樣品最低檢測限為0.6ug/L；組織樣品的回收率為80％±10％、飼料樣品的回收率為90％±10％、尿液樣品的回收率為70％±15％；本試劑盒同炔雌醇、雌酚酮、苯甲酸己烯雌酚、雌三醇的交叉反應率均小于0.1％。相對于其他己烯雌酚殘留檢測方法，本試劑盒所需儀器較少，只需要酶標儀、勻質器、振蕩器、微量移液器和氮氣吹干儀等實驗室常規儀器，同類實驗室一般均有配備，所需成本較低。

本實用新型的有益效果是：能快速、簡便、靈敏、準確地用于己烯雌酚藥物殘留的檢測。

(四)附圖說明：

圖1為本實用新型酶聯板的側面縱剖面圖(長為8.55cm)；

圖2為本實用新型酶聯板的側面橫剖面圖(長為12.8cm)；

圖3為本實用新型酶聯板的俯視圖；

圖4為本實用新型蓋板膜平面圖；

圖5為本實用新型試劑瓶縱剖面平面圖；

圖6為本實用新型固定泡沫模具的俯視圖；

圖7為本實用新型盒體與固定泡沫模具的側視圖。