[實用新型]鹽霉素ELISA檢測試劑盒

有效

• 申請號: 200920173198.8
• 申請日: 2009-08-28
• 公開（公告）號: CN201628716U
• 公開（公告）日: 2010-11-10
• 發明（設計）人: 何方洋;萬宇平;馮才偉;馮才茂;趙正苗;汪善良;羅曉琴;劉玉梅;李勇;余厚美;蒲曉容
• 申請（專利權）人: 北京望爾康泰生物技術有限公司;北京望爾生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/545
• 分類號: G01N33/545;G01N33/52;G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

(一)技術領域：本實用新型涉及檢測鹽霉素含量的試劑盒，特別是檢測動物源性食品中鹽霉素含量的酶聯免疫試劑盒。

(二)背景技術：鹽霉素(Salinomycin)屬于聚醚類獸用抗生素，對大多數革蘭氏陽性菌和部分霉菌起抗菌作用，單獨使用對雞球蟲病能發揮良好的預防效果。但使用鹽霉素不可過量，過量使用將會在動物體內大量蓄積，并會使所食用動物中毒死亡，通過食物鏈而危及人類健康。2002年12月我國農業部公告第235號文規定鹽霉素在肌肉中最高殘留量為600μg/kg，在皮膚、脂肪中的最高殘留量為1200μg/kg，在肝中的最高殘留量為1800μg/kg。歐盟自2006年，不再允許鹽霉素-鈉在飼料中添加。因此，檢測鹽霉素在動物性食品中的殘留量非常重要。

目前，常用于鹽霉素殘留檢測的方法主要有微生物法和儀器分析法。微生物檢測法雖然經濟、操作簡便，但在樣本中有其他微生物抑制劑存在時，其靈敏度和特異性受到限制。儀器分析法主要有高效液相色譜分析法(HPLC)、液-質聯機(LC-MS)、液質串聯質譜法(LC-MS/MS)等，這些方法的前處理過程繁瑣、檢測費用較高，不宜用于大量樣本篩查，推廣使用受到限制。

(三)實用新型內容：本實用新型所要解決的問題是提供一種小巧輕便的鹽霉素殘留量檢測試劑盒，其操作簡便，檢測快速、準確、靈敏度高，成本低，穩定性好，需要的技術含量不高，可進行一次連續多個樣品中鹽霉素殘留量的測定，減少了檢測樣本所需要的時間。

本實用新型的技術方案是：一種檢測食品中鹽霉素殘留量的酶聯免疫試劑盒，包括盒體和盒內的一塊96孔的酶標板、一張蓋板膜、14瓶試劑和放試劑的下凹瓶位、一個自封袋、一份說明書和一份質檢報告，其特征在于：采用96孔聚苯乙烯酶標板作為固相載體，酶標板由外框支撐架及放置其上的可拆的12條酶標反應微孔條組成，每個可拆裝酶標反應微孔條有8個反應孔，在試劑盒酶標板微孔條上預包被鹽霉素偶聯抗原制成檢測板，放入真空鋁箔袋中，盒體為硬紙盒，以塑料硬膜為蓋板膜，將6瓶1ml梯度濃度的標準品溶液、1ml高濃度標準品溶液、12ml酶標二抗、7ml鹽霉素抗體工作液、7ml顯色液A液、7ml顯色液B液、7ml終止液、40ml濃縮洗滌液、50ml濃縮復溶液試劑用不同大小、不同顏色的塑料瓶和玻璃瓶盛裝并固定在泡沫塑料模具中與酶標板、蓋板膜、自封袋、說明書、質檢報告一同封裝在硬紙盒內，以便于攜帶和運輸。每一個試劑盒中的試劑足夠進行96次測定(包括標準分析孔)，既可進行一次連續多個樣品的檢測，也可以將板孔拆開多次檢測。將剩下的放回鋁箔袋中用自封袋密封，這樣可以保證試劑盒檢測結果的準確性。檢測時，樣本中的鹽霉素將和酶標板微孔條上預包被的鹽霉素偶聯抗原競爭抗鹽霉素抗體，加入酶標二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與樣本中所含鹽霉素的含量成負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中鹽霉素含量，其操作簡便易行。

經實驗表明本試劑盒具有很高的靈敏度：肌肉/肝臟樣本的最低檢測限為5μg/kg、蛋類樣本的最低檢測限為20μg/kg；肌肉/肝臟樣本的回收率為75％±10％；蛋類樣本的回收率為80％±20％；相對于其他鹽霉素檢測方法，本試劑盒所需儀器較少，只需要酶標儀、氮氣吹干裝置、渦旋儀、離心機、振蕩機和微量加樣器等，同類實驗室一般均有配備，所需成本較低。

本實用新型的有益效果是：能快速、簡便、靈敏、準確地用于鹽霉素殘留量的檢測。

(四)附圖說明：

圖1為本實用新型酶聯板的側面縱剖面圖(長為8.55cm)；

圖2為本實用新型酶聯板的側面橫剖面圖(長為12.8cm)；

圖3為本實用新型酶聯板的俯視圖；

圖4為本實用新型蓋板膜平面圖；

圖5為本實用新型試劑瓶縱剖面平面圖；

圖6為本實用新型固定泡沫模具的俯視圖；

圖7為本實用新型盒體與固定泡沫模具的側視圖。

(五)具體實施方式