[實(shí)用新型]一種葉片PCR快速取樣裝置

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200920111961.4
• 申請(qǐng)日: 2009-09-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN201512535U
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李東宣;李娟;甘樹(shù)仙;譚學(xué)林;陳麗娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/26
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/26;C12N15/10
• 代理公司: 昆明今威專(zhuān)利代理有限公司 53115
• 代理人: 劉明哲

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種葉片PCR快速取樣裝置，快速制備PCR技術(shù)所需模板DNA樣品，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，PCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于遺傳育種的各個(gè)領(lǐng)域，如種子純度鑒定、種屬特異性鑒定、親緣關(guān)系的分析、目標(biāo)基因的追蹤、基因定位、遺傳分析以及轉(zhuǎn)基因植株的檢測(cè)等。

基于PCR技術(shù)的第一步必須提取待測(cè)樣品的基因組DNA作為模板，進(jìn)行相應(yīng)的PCR擴(kuò)增。常用的DNA提取方法有CTAB提取法和SDS提取法。CTAB(十六烷基三乙基溴化銨)法和SDS(十二烷基磺酸鈉)法提取的DNA質(zhì)量較高而且量大，但這兩種DNA提取方法所需的成本較高，技術(shù)性強(qiáng)，葉片用量大，程序復(fù)雜工作量大，在運(yùn)用分子標(biāo)記輔助選擇育種時(shí)，往往需要大量的待測(cè)群體，所以顯得費(fèi)時(shí)費(fèi)力花費(fèi)大。關(guān)于如何能夠更加快速的制備模板DNA，在不同的作物上先后報(bào)道一些關(guān)于DNA快速抽提的方法，如SDS一步法、微波水煮法、NaOH處理幼葉直接作為PCR模板法、TE研磨和振蕩法、剪切法。雖然這些方法在一定程度上簡(jiǎn)化了模板DNA制備的程序，提高了制備的效率，但仍存在不足之處，這些方法的操作效率不夠高，或制備的模板DNA的擴(kuò)增結(jié)果不理想，常常不能擴(kuò)增出目的片段。

目前，在快速制備PCR模板DNA樣品時(shí)還沒(méi)有一種快捷、方便的取樣裝置。先后報(bào)道的在一定程度上簡(jiǎn)化模板DNA的制備的方法，這些方法在取樣時(shí)為了減少所取樣品量的差異，需要對(duì)各個(gè)樣品進(jìn)行稱量，或是肉眼觀測(cè)剪取大小一致葉片樣品，這些方法都比較費(fèi)時(shí)，還很難克服樣品取樣量上的差異。

發(fā)明內(nèi)容

本實(shí)用新型克服了現(xiàn)有快速制備PCR模板DNA取樣過(guò)程中取樣費(fèi)時(shí)、費(fèi)事、樣品取樣量大小差異的不足，填補(bǔ)了無(wú)快速取樣裝置的空白，提供了一種可以快速，方便，取樣量一致的葉片PCR取樣裝置。

本實(shí)用新型包括注射器和針頭兩個(gè)部分，在柱塞1頂端2固定一顆實(shí)心針頭3，實(shí)心針頭3的尖端置于空心針頭4內(nèi)，實(shí)心針頭3的尖端不超出空心針頭4的端部；在柱塞1的頂端2與針筒5的頂部之間有一彈簧6；在柱塞1的頂端2后部有兩顆貫穿針筒邊緣的大頭針7，貫穿針筒邊緣的大頭針7與柱塞1不接觸。

本實(shí)用新型的有益效果是一種葉片PCR模板DNA取樣裝置，能快捷、方便的取樣PCR擴(kuò)增所需的模板DNA樣品；在取樣過(guò)程中不需要其他輔助的儀器設(shè)備和傳統(tǒng)的提取DNA的試劑藥品；用于取樣時(shí)所需PCR模板DNA材料的葉片量少，適合葉片少、葉片小的材料；使用葉片PCR模板DNA取樣裝置所取樣的葉片樣品大小一致，不用擔(dān)心不同待測(cè)材料由于樣品多少而引起的DNA濃度差異問(wèn)題；葉片PCR模板DNA取樣裝置所取樣的葉片樣品可直接進(jìn)行PCR，省去了其他處理步驟，并且其PCR效果和重復(fù)性好，特別合適大量群體的檢測(cè)。

附圖說(shuō)明

圖1：為本實(shí)用新型葉片PCR快速取樣裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖中1.柱塞，2.柱塞頂端，3.實(shí)心針頭，4.空心針頭，5.針筒，6.彈簧，7.大頭針。

具體實(shí)施方式

本實(shí)用新型包括注射器和針頭兩個(gè)部分。在柱塞1頂端2固定一顆實(shí)心針頭3，實(shí)心針頭3的尖端置于空心針頭4內(nèi)，實(shí)心針頭3的尖端不超出空心針頭4的端部；在柱塞1的頂端2與針筒5的頂部之間有一彈簧6；在柱塞1的頂端2后部有兩顆貫穿針筒邊緣的大頭針7，貫穿針筒邊緣的大頭針7與柱塞1不接觸。

本實(shí)用新型快速取樣使用操作步驟如下：

1、準(zhǔn)備PCR模板DNA材料葉片。

2、將材料葉片放于干凈的濾紙上，葉片PCR快速取樣裝置與葉片垂直，用裝置的空心針頭端部輕輕戳取材料葉片。

3、材料葉片在空心針頭的端部留下空心針頭直徑大小的材料樣品。

4、將帶有材料樣品的葉片PCR快速取樣裝置的空心針頭伸入PCR管的底部，輕推柱塞，使得留在空心針頭端部的材料樣品由實(shí)心針頭推出，樣品放于PCR管的底部。